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摘要原发性肝癌位于恶性肿瘤死亡率前列，具有发病率高，不易发现，病情发展迅速等特点，是现代分子细胞生物学，医学的研究热点。KDM5C(JARID1CorSMCX)属于组蛋白去甲基化酶家族，位于X染色体，含有一个ARID结构域，一个JmjC结构域，一个JmjN结构域和两个PHD型锌指的蛋白质，其中JmjC结构域主要发挥特异性去除H3K4me3的甲基残基的功能，而H3K4me3是一个重要的组蛋白修饰marker，可以影响其他基因的转录激活。<br>　　本课题通过实时定量PCR检测了KDM5C在人肝癌及癌旁组织的表达，结果显示相对于癌旁组织，KDM5C在肝癌组织中的表达上调。苏木精伊红（HE）染色和免疫组化的结果显示，KDM5C基因在肝癌组织的细胞核和细胞质中均有表达，但主要集中于细胞核内。为研究KDM5C在肝癌细胞中的功能，本文利用CRISPR/Cas9对KDM5C进行了敲除并建立了稳定的细胞系。首先利用CRISPR/Cas9的靶点设计网站进行KDM5C敲除位点的设计选择，随后将构建好的靶点连入pX458载体，转染肝癌HepG2细胞，利用有限稀释法建立KDM5C敲除细胞系(KDM5C-KO)并通过测序和WesternBlot进行了敲除验证。其次本论文研究了KDM5C对肝癌细胞生物学行为的影响。MTT增殖和克隆形成实验的结果显示，KDM5C敲除显著抑制了肝癌细胞HepG2的增殖和克隆形成；PI染色发现KDM5C敲除后，细胞S期比例下降，细胞增殖受到抑制；进一步研究发现KDM5C敲除促进了肝癌细胞的凋亡；细胞划痕和Transwell小室实验结果表明KDM5C敲除显著抑制了细胞迁移侵袭能力。<br>　　综上所述，本研究分析了KDM5C在肝癌中的表达及定位，通过CRISPR/Cas9进行KDM5C敲除并建立了稳转敲除细胞系。KDM5C基因敲除显著抑制了肝癌细胞增殖，迁移，侵袭，克隆形成，以上结果表明KDM5C通过促进肿瘤的发生在肝癌细胞中发挥功能。