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C-反应蛋白配体肽的筛选及应用

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摘要迄今为止，由于经济社会逐渐发生变革，居民的饮食结构和生活治疗在短时间内发生了显著地变化和提高，人们迫切地希望长寿以及膳食结构改善，但是随着环境的恶化和人类生活方式的改变，心血管疾病是危害着人类的健康的众多元凶之一，作为心血管疾病之一的冠心病（Coronary Heart Disease，CHD）的发病率和死亡率也日益增长，在医学上对冠心病的预防也没有得到良好的控制，C-反应蛋白(C-Reactive Protein,CRP)是在肝脏合成的急性时相蛋白中变化最显著的一种,也是早期检测诊断冠心病的一个重要敏感标志物。同时，CRP可作为指标用于及其他疾病的鉴别诊断、监测、病情评估、疗效判断等。目前用于检测CRP的方法均存在一定局限性，亟待建立一种快速、特异、灵敏、低成本检测C-反应蛋白的新方法。<br>　　本文利用噬菌体表面展示随机十二肽库对C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)特异性亲和配体进行了筛选，经三轮筛选、ELISA检测、重组噬菌体测序及序列比对后得到一个目标肽序列：S-P-H-N-R-S-N-L-V-Q-E-L。对此序列进行人工固相肽合成，并进行荧光标记物--异硫氰酸（FITC）标记制得特异性检测C-反应蛋白的配体肽探针，后经高效液相纯化及质谱鉴定，建立标准检测曲线，初步用于CHD病人血样检测，结果均呈明显的阳性。结果表明，我们获得的肽探针具有较好的临床应用效果，并通过人工合成肽的技术和生物标记技术来合成新型生物探针，从而快速、灵敏、特异地检测CRP，建立有效检测CRP的生物学新方法，为冠心病的早期检测诊断服务。