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摘要目的：<br>　　高黏性肺炎克雷伯菌（HMKP）可引起严重的侵袭性感染，威胁患者生命健康，现已成为一个全球性的问题。目前已经发现多种 HMKP 的毒力因子，在多种毒力因子的共同作用下，HMKP可以在宿主体内更好的生长存活，并突破宿主防御机制，造成致命的感染。虽然HMKP对常用的抗菌药物较少有耐药的现象，但是已有少数关于耐碳青霉烯类 HMKP 的报道。这些高毒力又高耐药的超级细菌给临床治疗带来了极大的困难。尽管有许多关于 HMKP 感染的研究报道，但涉及的HMKP菌株数量往往较少，且关于碳青霉烯耐药HMKP分离株的流行性和分子特征的文献有限。因此，本研究旨在探讨本院 HMKP 分离株在碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌（CRKP）中的流行情况及耐碳青霉烯类HMKP分离株的分子特征。<br>　　方法：<br>　　收集温州医科大学附属第一医院2013年1月至2015年12月临床分离的肺炎克雷伯菌 1838 株，应用 VITEK 全自动微生物分析仪进行菌种鉴定和药敏试验。根据药敏结果筛选亚胺培南耐药菌株140株，并用拉丝试验鉴定高黏液表型菌株21株。用E-test法测定亚胺培南和厄他培南的MIC值，用改良Hodge试验验证产碳青霉烯酶菌株，回顾性分析感染患者的临床资料。采用 PCR 方法检测21株菌株的主要荚膜血清型（K1、K2、K5、K20、K54和K57）、12种毒力相关基因（aerobactin、alls、entB、fimH、iroN、iutA、kfuB、rmpA、ureA、wcaG、ybtA 和 ycfM）和主要碳青霉烯类耐药基因（blaKPC、blaVIM、blaNDM-1、blaIMP、blaSIM-1、blaGIM、blaOXA-23和blaOXA-48）；应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点基因序列分型技术(MLST)进行分子流行病学分析。<br>　　结果：<br>　　21株耐碳青霉烯类HMKP，主要分离于2014年及2015年。占所有肺炎克雷伯菌1.1%(21/1838)，占耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌15.0%(21/140)。标本来源主要为痰液（14/21，66.7%）。其中，K20荚膜血清型7株（33.3%，7/21），K2荚膜血清型1株（4.76%,1/21），剩余13株（61.9%,13/21）荚膜血清型未分型。21株菌株对氨苄青霉素，氨苄西林/舒巴坦，头孢哌酮/舒巴坦和头孢曲松均全部耐药。耐药率在90%以上的抗菌药物为头孢他啶、头孢替坦、氨曲南和哌拉西林/他唑巴坦。21株耐碳青霉烯类HMKP均对多粘菌素敏感，仅1株分离株对磺胺甲恶唑/甲氧苄啶存在耐药现象。21 株菌株全部产碳青霉烯酶且携带 blaKPC-2基因，20株携带blaSHV-11基因，15株携带blaCTX-M-65。阳性检出率>90%的毒力相关基因分别是ureA(100%, 21/21)、fimH(95.2%,20/21)、entB(95.2%, 20/21)、ycfM(95.2%, 20/21)、ybtA(95.2%，20/21)和iutA(90.5%，19/21)。多位点序列分型（MLST）显示16株（11株K-非分型及5株K20型）ST11型、2株（K20型） ST268型、1株（K2型）ST65型、1株（K-非分型）ST692型以及1株新的序列型ST595（K-非分型）。脉冲场凝胶电泳（PFGE）结果显示21株菌株主要为2个PFGE克隆群，分别为A簇（6株ST11型，28.6%）及B簇（8株ST11型， 38.1%）。10株ST11型菌株分离自2014年（其中8株分离于2014年11月与12月），6株ST11型菌株分离于2015年。在分离自ICU的所有菌株中，8株为ST11型，另有5株菌株于2014年分离自非ICU病房，然而在此前患者均有大于10天的ICU住院史。<br>　　结论：<br>　　1、HMKP分离株在碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌中的流行率高。<br>　　2、在体外药敏实验中，耐碳青霉烯类高黏性肺炎克雷伯菌对多种抗生素耐药率高，而对磺胺甲恶唑/甲氧苄啶和多粘菌素有较高的敏感性。<br>　　3、本研究发现一个新的ST型肺炎克雷伯菌株，ST595型。<br>　　4、耐碳青霉烯类高黏性肺炎克雷伯菌主要携带blaKPC-2耐药基因。<br>　　5、耐碳青霉烯类高黏性肺炎克雷伯菌在医院存在克隆株的播散，主要为产KPC-2的ST11型菌株，应引起关注。