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摘要类弹性蛋白（Elastin-like polypeptides，ELPs）是具有弹性和温控性的生物大分子。本文研究拥挤试剂及渗透剂对基于超强分子粘合剂 SpyTag/SpyCatcher构建的三臂星型ELPs（EA+EBE）和蝌蚪状ELPs（Tadpole-like E）以及基于寡聚结构域 Foldon 构建的三臂星型ELPs（T-E-F）相变温度的影响，利用温控型紫外分光光度分析，荧光光谱分析等技术研究其相变特性，为今后ELPs在复杂体系的应用提供前期的基础研究，也为其他无序结构蛋白的研究提供借鉴。实验结果表明，不同拓扑结构的ELPs在拥挤试剂和渗透剂的环境体系中的相变特性与在简单缓冲溶液中的相变规律不同，具体结果如下：<br>　　首先，在渗透剂的溶液体系中研究发现，随着蔗糖浓度的增加，EA+EBE和T-E-F相变温度下降2℃左右，Tadpole-like E相变温度几乎不变；随着山梨醇浓度的增加，不同拓扑结构ELPs相变温度降低2~4℃；随着海藻糖浓度的增加，不同拓扑结构ELPs相变温度降低3~6℃。渗透剂对不同拓扑结构ELPs相变温度的作用效果依次是海藻糖＞山梨醇＞蔗糖，且ELPs自身的浓度对其相变温度的影响要比渗透剂要强。<br>　　其次，发现不同分子量PEG对25 μmol/LELP40相变温度的作用效果不同，随着PEG分子量的增加，对ELP40的相变温度效果是逐渐增加到降低，而对25 μmol/L ELP120相变温度的作用效果，是随着PEG分子量的增加，其相变温度降低；随着PEG2000浓度的增加，EA+EBE的相变温度下降14~16.6℃，T-E-F的相变温度下降11.9~17.1℃，Tadpole-like E的相变温度降低11.5~16℃，其中，25 μmol/L的Tadpole-like E其相变速度缓慢；ELPs浓度越大，其相变温度降低越大；PEG2000对ELPs相变温度的影响与ELPs的拓扑结构关系不大。<br>　　最后，在研究25 μmol/L E-C的单一盐（Na2CO3、Na2SO4、NaCl）溶液体系中加入拥挤试剂时，结果发现，E-C在Na2CO3＜0.5 mol/L浓度会发生相变；当Na2CO3浓度增至0.5 mol/L时，PEG2000浓度小于0.15 g/mL，E-C会发生二次相变。E-C在不同盐/PEG2000体系中的相变温度差异很大，随着PEG2000浓度的增加，在0.5 mol/L Na2CO3/PEG2000体系中E-C相变温度降低46℃左右，在0.5 mol/L Na2SO4/PEG2000体系中其相变温度升高22℃左右，在 1.0 mol/L NaCl/PEG2000体系中，其相变温度维持在33℃左右，而线性ELP40的相变温度在相同各个盐/PEG2000体系中是降低的。