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摘要CRISPR-Cas系统是细菌和古菌的RNA介导的适应性免疫系统，可以针对性切割外源核酸序列，目前已发展为使用最为普遍的基因编辑工具。Ⅱ型CRISPR-Cas的部分亚型(如A、B、C)依赖于反式激活CRISPRRNA(tracrRNA)干扰入侵序列及使pre-crRNA成熟。经RNA酶Ⅲ处理后，tracrRNA与crRNA复合体激活CRISPR相关核酸内切酶Cas9(Csn1)切割位点特异性同源的靶DNA。因此识别tracrRNA对于研究开发新的CRISPR-Cas系统的基因组编辑工具有着重要的作用。<br>　　本文收集了54条已知的tracrRNA构成阳性训练集，对已知的tracrRNA随机改组，构造具有tracrRNA结构特征并且与已有tracrRNA具有相同核苷酸组成的“假tracrRNA”数据集，构成阴性训练集。通过伪核苷酸组分PseKNC方法表征原始训练集，作为训练分类器的特征数据集。采用机器学习的方法构造分类器，在训练过程中，使用留一法交叉检验评估分类器的性能，使用基于方差分析的特征选择技术进行特征优化，去除模型构建过程中包含的不相关的冗余特征，最终获得基于最优PseKNC参数的特征数最小，性能最好的tracrRNA分类器。<br>　　使用支持向量机和朴素贝叶斯、随机森林等其他机器学习算法进行比较时，支持向量机在训练模型过程中的预测性能明显优于其他方法。基于支持向量机，通过特征选择筛选以及留一法评估，当PseKNC参数k为5，j为1，w为0.5，特征数为171时，训练的tracrRNA分类器具有最优的预测性能，其敏感性为98.15％，特异性为100%，准确率为99.07%，MCC为98.16%，ROC曲线下面积为0.998。该结果说明，该分类器在区分tracrRNA与具有tracrRNA结构特征和氨基酸组成的“假tracrRNA”具有非常好的区分能力，为识别新的tracrRNA以及实验过程中设计优化tracrRNA提供了强有力的辅助手段。