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改良Calcofluor White荧光染色法在皮下真菌病组织病理诊断中的应用分析

摘要目的:<br>  皮下真菌病往往需通过组织病理检查来确诊,传统的染色方法已愈加难以满足日益增加的临床需求。本实验是为了探讨改良Calcofluor White (CFW)荧光染色法在皮下真菌病组织病理诊断中的应用价值。<br>  方法:<br>  1.选取1987-2017年承德医学院附属医院收治的21例皮下真菌病例,包括头面部感染2例,上肢感染14例,下肢感染5例。<br>  2.对选取的21例病例进行组织病理检查。真菌类型包括孢子丝菌病11例,着色芽生菌3例,石膏样癣菌1例,念珠菌属1例,毛霉菌属1例,其中3例未能明确菌种。<br>  3.收取石蜡包埋组织,进行平行试验,每块组织连续切片4μm切片,分别行改良CFW荧光染色、HE染色、PAS染色和GMS染色及阴性对照。将改良CFW荧光染色切片在荧光显微镜紫外激发光(UV)滤镜下镜检,HE染色法、PAS染色法和GMS染色法在普通光学显微镜下镜检,判定阳性结果,采集图像。<br>  4.采用SPSS 19.0软件,使用卡方检验比较4种染色法在病理诊断真菌感染方面的阳性率。<br>  结果:<br>  1. 21例皮下真菌感染患者中,改良CFW荧光染色法检出阳性14例(66.67%),HE染色法检出阳性5例(23.80%),PAS染色法检出阳性6例(28.57%),GMS染色法检出阳11例(52.38%)。改良CFW荧光染色法阳性率高于HE和PAS染色法,差别有统计学意义(χ2=6.718、5.200,P=0.012,0.029)。改良CFW荧光染色法与GMS染色法阳性率差异无统计学意义(χ2=0.693,P=0.530;P>0.05)。<br>  2. 在紫外激发光(UV滤镜)下,经改良CFW染色法染色,孢子丝菌、念珠菌及未知菌种感染皮下组织中可见呈亮蓝色的菌丝及孢子,背景黑暗,真菌的形态特征清晰、明显,阴性对照组背景黑暗,无荧光反应。<br>  3. 在4种染色方法真菌成分均为阳性的4例标本中,改良CFW染色法与其余染色方法相比,真菌形态特征更清晰,与背景反差更明显。<br>  结论:<br>  改良 CFW 荧光染色法需要的试剂更简单、操作步骤简便、染色效果更佳、敏感性更高,有更高的实用性。

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