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摘要目的：<br>　　结肠癌（Colon cancer，CC）是消化道的常见恶性肿瘤。中国2015癌症统计数据显示，中国结肠癌发病率和死亡率在所有恶性肿瘤中排名前五，其中新发病例37.6万，死亡病例19.1万。结肠癌的高发病率与高死亡率与结肠癌的恶性侵袭性病理特征相关。由于对结肠癌整体评估水平不高，使部分结肠癌患者未能规范化治疗，预后较差。目前仍缺乏可以用于评估肿瘤的恶性程度、治疗及判断预后的特异性分子标记物。<br>　　miRNAs是一种内源性非编码小分子RNA,长度约19～25 个核苷酸。是人体细胞中功能基因和蛋白表达的重要调控分子。通过与靶mRNA 3’非翻译区(untranslated region，UTRs)的结合，或通过沉默复合体剪切和降解靶mRNA，使基因的表达及蛋白的翻译在转录后水平受到调节，从而影响细胞的生物学功能。结肠癌组织中存在多种异常表达的miRNA，不同异常表达 miRNA 在结肠癌中所扮演的角色不同，其在临床中的应用价值不同。后续研究表明，miRNA的功能特征主要依赖于靶基因。一个miRNA可调节多个靶基因，并且多个miRNA可同时作用于相同靶基因，在细胞中形成了复杂的调节网络。然而不同 miRNA 在调控网络中所处位置不同。调控网络中关键的核心分子可以通过多种靶基因影响肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭等生物学特性，进而可影响肿瘤的临床病理特征，如肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移、远处转移等。近年来， miRNA-135b-5p 在肿瘤中的作用越来越受到研究人员的重视。miRNA-135b-5p在多种实体肿瘤中发挥重要作用，作为癌基因或抑癌基因参与肿瘤的形成。本研究应用实时定量PCR技术检测结肠癌组织及癌旁组织标本中miRNA-135b-5p表达水平，分析miRNA-135b-5p表达水平与结肠癌临床病理特征之间的关系，为临床应用miRNA-135b-5p作为评估肿瘤恶性程度、判断预后的分子靶点提供依据，进一步为 miRNA的功能研究提供候选基因及可能的治疗靶点。<br>　　方法：<br>　　1、病例收集：<br>　　纳入标准（1）2017年9月至2018年10月在承德医学院附属医院内镜室行结肠镜检查及后期术后病理检查确诊为结肠癌；（2）均为首次发现结肠癌，未经任何化疗、放疗及靶向治疗；（3）患者临床病理资料完整。排除标准（1）具有遗传性肠道疾病（家族性腺瘤性息肉病、遗传性非息肉病性结肠癌）家族史患者；（2）患有其他部位肿瘤或结肠部分切除术后的患者；（3）胆囊切除术后患者；（4）结肠腺瘤、炎症性肠病患者。共纳入结肠癌组织42例，配对癌旁粘膜组织42例。其男性28例，女性14例。年龄48-82岁，平均年龄64.95±8.34岁。<br>　　2、根据AJCC/UJCC结肠癌TNM分期系统（第7版），其中肿瘤侵犯粘膜下层为T1、侵犯固有肌层为T2、肿瘤穿透固有肌层到达浆膜下层或侵犯无腹膜覆盖的结肠旁组织为T3、肿瘤穿透腹膜腹膜脏层为T4。无区域淋巴结转移为N0，1-3枚区域淋巴结转移为N1，4枚以上区域淋巴结转移为N2。无远处转移为M0，有远处转移为M1。根据2010WHO结肠腺癌分级标准，＞95%腺管形成为高分化、50%-95%腺管形成为中分化，0-49%腺管形成为低分化。于承德医学院附属医院病理科收集42例结肠癌组织临床病理特征，其中肿瘤直径＞5cm的患者21例，≤5cm的患者21例；以结肠脾区为界，右半结肠33例，左半结肠9例；浸润深度T2-T3者15例，T4者27例；有淋巴转移24例，无淋巴结转移18例；远处转移8例，无远处转移34例；高中分化5例，中分化29例，中低分化8例。临床分期为II期12例，III期22例，IV期8例。所有病理切片均经两位病理科有经验的副主任医师证实符合WHO结肠腺癌标准。<br>　　3、应用实时定量 PCR 技术检测结肠癌组织、癌旁粘膜组织中miRNA-135b-5p的表达水平。<br>　　4、应用SPSS 19.0分析数据，正态分布的计量数据以（ X ±S）表示，组间比较采用t检验。结肠癌患者临床病理特征与组织中miRNA表达水平之间的差异采用 t 检验。对差异有统计学意义的结果，采用Logistic回归二项分析法分析miRNA表达水平与临床病理特征之间的相关性。P＜0.05 为差异有统计学意义。<br>　　结果：<br>　　1、结肠癌组织与癌旁粘膜组织中miRNA-135b-5p的表达量的比较。<br>　　结肠癌组织中miRNA-135b-5p表达水平（28.15±0.91）较癌旁粘膜组织（17.93±0.76）显著升高（P＜0.05），差异有统计学意义。<br>　　2、结肠癌组织临床病理特征中miRNA-135b-5p表达量的差异比较。<br>　　实时定量PCR检测miRNA-135b-5p相对表达量，结果显示，在＞5cm的和＜5cm 肿瘤组织中 miRNA-135b-5p 表达量分别为 31.17±1.00 和25.13±1.21（P<0.05）。浸润深度为T2-T3和T4的肿瘤组织中，其表达量分别为21.48±0.94和31.86±0.53（P<0.05）。无淋巴结转移和有淋巴结转移肿瘤组织中的表达量分别为22.76±1.22和31.50±0.49 （P<0.05）。无远处转移和有远处转移的肿瘤组织中，其表达量分别为27.27±1.05 和 31.89±0.96（P<0.05）。临床分期为 III、IV 的患者miRNA-135b-5p的表达量为30.46±0.97、31.89±0.96均较II期21.43 ±1.13 患者高（P<0.05）。肿瘤分化程度为中分化、中低分化的患者miRNA-135b-5p 的表达量为 28.34±1.02、32.29±1.12 均较高中分化20.46±1.97高（P＜0.05），差异具有统计学意义。而临床分期为III、IV之间，中分化、中低分化之间，左右半结肠之间比较，miRNA-135b-5p表达量差异无统计学意义（P＞0.05）。<br>　　3、结肠癌组织中miRNA-135b-5p表达水平与肿瘤临床病理特征的相关性。<br>　　42例结肠癌组织中miRNA-135b-5p表达平均值为28.15±0.91，根据临床病理特征，各组均分为高表达和低表达组。采用二项 Logistic分析 miRNA-135b-5p 表达水平与临床病理特征的相关性，结果显示， miRNA-135b-5p 表达量的增高与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移、临床分析、分化程度存在相关性（P＜0.05），而与肿瘤远处转移无明显相关性（P＞0.05）。<br>　　结论：<br>　　结肠癌组织中miRNA-135b-5p表达水平显著升高，发挥类似癌基因的作用。其异常高表达与结肠癌的恶性侵袭性生物学行为存在密切关系，提示其可作为评估肿瘤的恶性程度及预后判断的标志物。