检索历史 清除

摘要真核生物进化的应激反应对维持细胞稳态和应对外界刺激是有利的，找到应激反应的调控机制对预防、减轻甚至治愈严重应激反应相关疾病具有重要意义。在生物体整个生命过程中，转录因子Nrf1是维持细胞稳态及生长发育的重要参与者，转录因子Nrf2在调控细胞内环境氧化还原稳态方面也具有极其重要的作用，其功能涉及到细胞生命活动各个方面，二者在结构上很相似，功能上也有一部分重叠。Nrf1的亚型Nrf1D结构虽与Nrf1相似，但其独特的C端末端朝向内质网腔内侧的跨膜区，使其比Nrf1在内质网膜上结合更紧密。为了了解Nrf1、Nrf2与应激反应的关系及Nrf1D的生化特性，本文初步探讨了用DTT诱导细胞，模拟细胞氧化应激和内质网应激环境，利用qPCR技术和Western Blot技术检测Nrf1及Nrf2对细胞氧化应激基因和内质网应激基因的差异作用，并对 Nrf1D 是否因其独特的结构而存在功能差异进行了挖掘。得到以下结论：<br>　　① DTT刺激下可使细胞内Nrf1及Nrf2表达上调，且Nrf1转录水平和翻译水平变化可能是DTT刺激及其引起的应激反应共同作用的结果；<br>　　② Nrf1 与 Nrf2 差异性调控氧化应激和内质网应激相关基因表达水平，其中Nrf1在维持细胞稳态的基因调控作用中更为显著，而Nrf2更偏重于对应激反应基因的调控；<br>　　③ Nrf1D亚型存在于小鼠多个组织包括血浆中。Nrf1D在核内的85kDa活性蛋白较少，大部分存在于胞质内；<br>　　④ Nrf1D相较于Nrf1更为稳定，其受到独特的TMc相关膜的部分保护，抵御细胞内蛋白酶体的降解，且其TMc区域对Nrf1D有加工修饰作用。<br>　　综上所述，Nrf1及Nrf2在调控氧化应激和内质网应激基因方面具有一定的协同作用。Nrf1D广泛存在于小鼠多个组织，且大量存在于血浆中，因此推测它经过潜在的分泌通路到达血浆。但是，本研究只是初步解析Nrf1D结构特性，为进一步探索其独特功能提供了一个有意义的基础。