摘要目的:研究系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞中miR-150和其靶基因C-MYB、C-MYC的表达水平在发病机制中的作用,以及与 SLE 实验室相关指标、临床疾病活动度的之间的关系,初步探索miRNA-150和C-MYB、C-MYC在SLE中的作用机制,为SLE的诊断及判读病情提供可靠的实验室指标。<br> 方法:首先,通过双荧光素酶报告基因实验构建质粒,综合生物信息学分析结果验证 miR-150 靶基因 C-MYB、C-MYC;其次,选取符合系统性红斑狼疮诊断标准的患者94例,根据SLE患者系统性红斑狼疮疾病活动度评分(Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index,SLEDAI)标准,分为高活动组36例(SLEDAI≥15分),中活动组30例(15分>SLEDAI≥10分)和低活动组30例(10 分>SLEDAI≥5 分)以及选取健康对照人群 44 例作为对照组,提取总RNA及miRNA。采用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time,qPCR)技术检测miR-150和C-MYB、C-MYC的表达水平。统计学分析其与SLE疾病活动度及 SLE 相关检验指标的关系。构建受试者工作特征曲线(ROC 曲线),分析miRNA-150诊断SLE的价值。<br> 结果:1. 前期利用生物信息学方法筛选出以C-MYB、C-MYC为靶基因的共同microRNA中包括miR-150,双荧光素酶报告基因实验证明C-MYB、C-M YC是miR-150的靶基因,miR-150的过度表达能够抑制C-MYB、C-MYC的表达<br> 2. SLE患者中miR-150表达水平显著低于健康对照组(P<0.05),高活动组显著低于中活动组(P<0.05)、中活动组显著低于低活动组(P<0.05)、低活动组低于健康对照组(P<0.05)。<br> 3. SLE患者中C-MYB表达水平显著高于健康对照组(P<0.05),高活动组显著高于中活动组(P<0.05)、中活动组显著高于低活动组(P<0.05)、低活动组与健康对照组差异无统计学意义(P>0.05)。<br> 4. SLE患者C-MYC表达水平显著高于健康对照组(P<0.05),高活动组显著高于中活动组(P<0.05)、中活动组显著高于低活动组(P<0.05)、低活动组高于健康对照组(P<0.05)。<br> 5. miR-150与C-MYB之间的相关性分析显示两者负相关(r=-0.724,P=0.012);miR-150与C-MYC之间的相关性分析显示两者负相关(r=-0.529,P=0.024)。指标的相关性分析:miR-150与抗dsDNA抗体、AnuA抗体呈负相关(r=-0.482, P=0.021;r=-0.725,P=0.035);C-MYB与SLEDAI评分呈正相关(r= 0.439, P=0.018);C-MYC与SLEDAI评分、ESR呈正相关(r=0.609,P=0.012;r=0.456, P=0.032)。<br> 6. miR-150诊断SLE的ROC 曲线下面积(AUC)为0.825〔95% 可信区间(95%CI)=0.745~0.905〕。当miR-150截断值为0.53时,其诊断SLE的敏感度为65.9%,特异度为87.5%。但当将miR-150和抗dsDNA抗体、AnuA抗体联合诊断SLE时,曲线下面积(AUC)为0.913〔95% 可信区间(95%CI)=0.872~0.955〕。当截断值为0.71时,其诊断SLE的敏感度为80.9%,特异度为90.2%。<br> 结论:1. miR-150在SLE患者表达降低,而C-MYB、C-MYC在SLE患者表达升高,提示miR-150和C-MYB、C-MYC可能与RA发病有关。<br> 2. miR-150与抗dsDNA抗体、AnuA抗体呈负相关,ROC曲线显示miR-150对SLE有一定的诊断价值。三者联合诊断,其诊断效能更高。<br> 3. C-MYB与SLEDAI评分呈正相关,表明C-MYB能在一定程度上反映S LE的疾病活动度。<br> 4. C-MYC与SLEDAI评分、ESR呈正相关,表明C-MYC能更好的提示疾病活动性,有望成为一种新的活动度指标。
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