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摘要目的 采用雌激素膜受体 GPR30 特异激动剂 G1、特异拮抗剂 G36 为工具药，研究GPR30激活降低手术绝经大鼠全脑缺血后海马CA1区神经炎症损伤的作用，并揭示其可能的分子机制。<br>　　方法1 SPF级雌性SD大鼠（3月龄）用于本研究。实验动物行双侧卵巢切除术建立手术绝经模型，并随机分为假手术组 （ Sham ）、缺血再灌注 14d 组（Ischemia reperfusion，IR14d）、G1处理组（IR14d+G1）和G36处理组（IR14d+G1+G36）。采用四动脉结扎法制备大鼠全脑缺血模型（Global cerebral ischemia，GCI）；2 免疫荧光双染色观察 GPR30 等蛋白的细胞定位及蛋白表达水平；3 NeuN（生存神经元细胞核标志蛋白）免疫荧光染色及TUNEL技术观察海马CA1区神经元生存及凋亡情况；4 Western blot（WB）技术检测NLRP3炎性小体成员等蛋白表达水平；5 G1和G36的给药方式为切除大鼠卵巢同时皮下埋置微量释放泵至实验结束。<br>　　结果1 GPR30激活降低GCI诱导的海马CA1区神经炎症损伤。GPR30与小胶质细胞标志蛋白Iba1免疫荧光双染色结果显示：与sham组相比，IR组Iba1免疫荧光强度显著增强，并呈现Iba1与GPR30较强的共定位；G1显著降低Iba1蛋白水平，且少见 GPR30 与 Iba1 的共定位；G36 显著逆转了 G1 的影响。另外，NeuN免疫荧光染色和TUNEL分析结果显示：与sham组相比，GCI可诱导海马CA1区生存神经元（NeuN 阳性染色）数量显著减少（P＜0.05），而凋亡样细胞（TUNEL阳性染色）显著增加（ P＜0.05 ）；给予 G1 后生存神经元数量显著增多（P＜0.05），而凋亡细胞数量则显著减少（P＜0.05），G36 可逆转 G1 的作用。2 GPR30 激活降低海马 CA1 区炎性小体成员 NLRP3、ASC 蛋白表达。WB 结果显示，G1 可显著降低缺血后 NLRP3 和 ASC 的蛋白表达水平（P＜0.05），与 Sham组相比无显著差异（P＞0.05），而给予G36后NLPR3和ASC的蛋白表达较G1处理组显著升高（P＜0.05）。NLRP3/Iba1、ASC/CD11b 免疫荧光双染色结果验证了WB结果。并且，在IR组和G36处理组海马CA1区显示NLRP3、Iba1蛋白高表达且很强的共定位；同样，ASC 和小胶质细胞标志蛋白 CD11b 的蛋白表达较 G1和Sham组显著升高且二者高度共定位。3 GPR30激活抑制缺血后海马CA1区Caspase1激活（Cle-cas1）。WB结果显示，G1能够明显降低缺血后Cle-cas1的蛋白水平（P＜0.05），与 Sham 组相比无显著差异（P＞0.05），而给予 G36 后 Cle-cas1水平较G1处理组明显升高（P＜0.05）。4 GPR30激活降低缺血后海马CA1区IL1β激活（Cle-IL1β）。WB结果显示，与IR组相比，G1可显著降低缺血后海马CA1区Cle-IL1β蛋白水平（P＜0.05）；而G36处理组较G1处理组Cle-IL1β蛋白水平显著升高（P＜0.05）。CD11b 与 Cle-IL1β 的免疫荧光双染色结果验证了WB结果；并且可见IR组和G36处理组海马CA1区Cle-IL1β与CD11b的免疫共定位。5 GPR30激活上调缺血后海马CA1区IL1β受体拮抗剂IL1RA的蛋白水平。WB结果显示，与IR组相比，G1能够明显升高缺血后海马CA1区IL1RA的蛋白表达水平（P＜0.05），而给予 G36 可逆转 G1 对 IL1RA 蛋白表达的影响，显著降低了IL1RA蛋白水平（P＜0.05）。CD11b与IL1RA的免疫荧光双染色结果验证了 WB 结果。IL1RA/NeuN、IL1RA/CD11b 免疫荧光双染色结果显示，Sham 组和 G1 处理组海马 CA1 区 IL1RA 表达于 NeuN 阳性染色细胞（P＜0.05），而 IR组和 G36 处理组显示 IL1RA 主要定位在 CD11b 阳性染色的小胶质细胞（P＜0.05）。<br>　　结论1 GPR30激活降低GCI后海马CA1区神经元的炎症损伤。<br>　　2 GPR30激活降低GCI后海马CA1区NLRP3炎性小体活性。<br>　　3 GPR30 降低全脑缺血后海马 CA1 区神经炎症损伤的分子机制可能与其上调IL1RA的蛋白水平密切相关。