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摘要近年来，大气压低温等离子体（cold atmospheric plasma, CAP）在医学尤其是皮肤科中的应用研究已成为国内外的研究热点。研究表明 CAP 可适用于皮肤伤口杀菌消毒、创伤愈合、组织再生以及治疗各种皮肤肿瘤性和炎症性疾病等。银屑病是一种常见的炎性增生性皮肤病，其发病机制尚未完全明了，现有的治疗手段均无法完全治愈银屑病。角质形成细胞（keratinocyte, KC）过度增殖，表皮增厚是银屑病皮损的特征性表现之一。研究表明 CAP 处理可以抑制细胞增殖，诱发细胞凋亡；此外，还有研究表明CAP中的活性氧（reactive oxygen species, ROS）具有免疫调节的作用，因此推测CAP可用于治疗银屑病。本课题主要针对CAP对KC增殖的影响来研究其对银屑病的治疗作用，进行了大气压等离子体射流（atmospheric pressure plasma jet, APPJ）对HaCaT细胞增殖和咪喹莫特（IMQ）诱导的银屑病样小鼠模型的影响研究。主要内容和结果概括如下：<br>　　1. 研究 APPJ 装置的放电特性，使用 APPJ 处理培养基得到等离子体活化培养基（plasma activated medium, PAM），检测不同处理时间PAM的PH值和主要活性物质的含量。结果表明，随着处理时间延长，PAM中各种活性物质的含量逐渐增多， PH值并无显著改变。<br>　　2. 检测PAM对HaCaT细胞增殖的影响及相关作用机理。结果表明，PAM处理可以诱导细胞形态变化、抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡，并且这种作用是通过诱导细胞内ROS水平上升引起的，呈PAM强度依赖。<br>　　3. 构建两种常规的细胞炎症模型模拟银屑病皮损的炎性微环境，检测PAM对细胞增殖的影响。结果表明，与正常的HaCaT细胞相比，炎性状态下的细胞对相同强度的PAM更加敏感。推测是由于LPS或TNF-α诱导后，细胞内ROS水平增高，处于氧化应激状态而对 PAM 的耐受性降低所引起。正常 HaCaT 细胞和炎性诱导HaCaT细胞的共培养体系，也进一步验证其对PAM的敏感性差异。<br>　　4. 根据PASI评分、HE染色切片考察APPJ对IMQ诱导的银屑病样小鼠模型的治疗作用。结果表明，IMQ诱导的模型组小鼠出现典型的银屑病样皮损，APPJ处理后皮损PASI积分下降，HE染色趋于正常，表明APPJ对IMQ诱导的银屑病样小鼠模型具有治疗作用。<br>　　5. 通过免疫组化和免疫荧光检测APPJ对皮损局部KC增殖（Ki67）及凋亡（active caspase-3）情况的影响。结果显示，模型组小鼠表皮Ki67阳性细胞比例升高，APPJ处理后，Ki67阳性细胞比例显著降低，但表皮细胞的凋亡无明显变化。表明APPJ主要通过抑制皮损KC异常增殖来发挥治疗作用。<br>　　6. 采用免疫组化方法检测 APPJ 对银屑病样皮损局部炎性状态及血管新生情况的影响。结果显示，APPJ 处理后皮损局部 CD3 阳性细胞浸润明显减少；炎性因子TNF-α、IL-17和 IL-22 表达明显降低；新生血管也明显减少。表明 APPJ 还可以通过抗炎、抗血管新生来发挥治疗作用。