检索历史 清除

摘要目的:<br>　　1.探究腹腔注射成纤维生长因子2（FGF2）能否改善脓毒症小鼠肺组织病理表现、肺组织细胞凋亡情况。<br>　　2.探索FGF2腹腔注射是否能改善脓毒症小鼠肺部炎症情况。<br>　　方法:<br>　　1.39只雄性C57BL/6小鼠（10-12周），随机分成三组，每组13只：脓毒症模型组(CLP组)、假手术组（Sham组）、FGF2治疗组（CLP+FGF2组）。其中，CLP组小鼠应用盲肠结扎穿孔术（CLP）制造脓毒症模型，造模完成后予以1ml生理盐水促进复苏；Sham组小鼠则仅进行开关腹手术；FGF2治疗组小鼠在CLP模型基础上，造模成功6小时后，予以0.1mg/kg的注射量，腹腔注射FGF2；而CLP组小鼠则予以等量磷酸盐缓冲液（PBS）腹腔注射。<br>　　2.小鼠造模24小时后，处死小鼠，肺组织部分用于组织切片，做HE染色并进行肺组织损伤评分，以及用于TUNEL检测，同时应用共聚焦观察肺细胞凋亡情况。部分肺组织应用蛋白质免疫印迹技术和实时荧光定量PCR技术检测肺组织炎症及肺损伤相关指标在蛋白水平和基因水平表达情况。<br>　　结果:<br>　　1.小鼠肺组织病理学变化中，与Sham组相比，CLP组小鼠肺组织严重水肿，其中可见大量炎性细胞、血细胞浸润、肺泡腔变窄、肺泡结构破坏且模糊；而FGF2治疗组小鼠肺组织损伤情况明显有所减轻，炎性细胞及血细胞浸润情况有所缓解，肺泡结构改善较明显。<br>　　2.肺组织病理损伤评分中较于Sham组，CLP组小鼠肺组织损伤评分得分明显高于Sham组小鼠，差异具有统计学意义（P<0.05）；而在FGF2治疗后，小鼠肺组织损伤评分得分明显下降，差异具有统计学意义（P<0.05）。<br>　　3.较于Sham组，CLP组小鼠肺组织中炎症因子IL-10、TLR-4在mRNA水平表达明显升高（P<0.05），而在FGF2治疗后IL-10、TLR-4有所下降，且差异均具有统计学意义（P<0.05）；较于Sham组，CLP组小鼠肺组织中FGFR1、FGFR2在mRNA水平明显下降（P<0.05），差异具有统计学意义，而在FGF2治疗后FGFR1、FGFR2有所升高，差异不具有统计学意义（P>0.05）。<br>　　4.与Sham组相比，CLP组小鼠肺组织中CXCL1、CXCL10、MCP-1、ICAM-1等趋化因子和黏附分子在mRNA水平的表达明显升高，FGF2注射治疗后上述指标均有所下降，且差异均具有统计学意义（P<0.05）；与Sham组相比，CLP组肺组织中CX3CL1的mRNA表达水平明显下降，FGF2治疗后有所升高，且差异均具有统计学意义（P<0.05）。<br>　　5.肺组织中炎症相关指标蛋白的表达，较于Sham组，CLP组小鼠肺组织中基质金属蛋白酶MMP-8、通路蛋白P-65等指标在蛋白水平表达明显升高，而在FGF2治疗后，上述指标表达均有所下降；较于Sham组，CLP组小鼠肺组织Bax蛋白变化不明显，而在FGF2治疗后，Bax蛋白水平表达有所下降。较于Sham组小鼠，CLP组小鼠Bcl-2蛋白表达有所下降，在FGF2治疗后，Bcl-2蛋白有所上升。<br>　　6.对比于Sham组，CLP组小鼠肺组织中组织免疫荧光TUNEL的阳性点明显增多，细胞凋亡明显增加，而FGF2治疗组TUNEL的阳性点明显减少，细胞凋亡明显减少。<br>　　结论:<br>　　1.成纤维生长因子2腹腔注射，能够明显改善脓毒症小鼠肺组织病理损伤。<br>　　2.成纤维生长因子2腹腔注射，能够明显降低脓毒症小鼠肺部趋化因子及黏附分子的表达，从而改善脓毒症小鼠肺部炎症细胞的聚集；<br>　　3.成纤维生长因子2腹腔注射，能够明显降低脓毒症小鼠肺部炎症指标的表达，从而改善脓毒症小鼠肺部炎症反应；<br>　　4.成纤维生长因子2腹腔注射，能够降低脓毒症小鼠肺组织细胞的凋亡。