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摘要目的：探讨高压氧治疗在脊髓损伤(SCI)大鼠中对细胞凋亡和树突/突触退变的影响及其作用机制。<br>　　方法：选取清洁级成年雄性SD大鼠80只，2-3月龄，体重200-250g。按随机数字法随机分为假手术组（S,n=16）、模型组（M,n=16）、高压氧治疗模型组(HM,n=16)、抑制剂模型组(IM,n=16)、高压氧治疗+抑制剂模型组(IHM,n=16),共5组。S组仅行椎板切除，暴露脊髓，但不进行脊髓打击；其余4组均采用改良Allen’s法制备大鼠脊髓损伤（SCI）模型，IM及IHM组的大鼠在术后及每隔24h腹腔注射TrkB特异性抑制剂ANA-12（0.5mg/kg），S、M和HM组均腹腔注射等量生理盐水。HM和IHM组的大鼠在术后6h开始，给予连续7d的高压氧治疗，每天1次。各组大鼠在术后6h、1d、3d、7d进行BBB运动功能评分。术后7d处死大鼠，提取各组损伤区1.5cm脊髓，用HE和Nissl染色法观察损伤部位脊髓前角的组织形态和神经元结构的变化；用TUNEL染色法观察脊髓前角细胞凋亡的情况；用WB法检测BDNF、TrkB、c-caspase3、Bax/Bcl-2、MAP-2和PSD95蛋白表达量的变化；免疫荧光法检测c-caspase3/DAPI、NEUN/DAPI、MAP-2/DAPI和PSD-95/DAPI阳性细胞的表达量；RT-qPCR检测BDNFmRNA和TrkBmRNA表达量的变化；用Golgi染色法和Sholl分析法观察分析脊髓前角神经元树突的总长度、分支总交点数、以及树突棘的密度；电镜观察脊髓前角神经元形态和突触超微结构的改变。<br>　　结果：<br>　　1、BBB行为学评分结果：S组的行为学评分均为21分，无运动功能缺损症状，造模后6h、1d及3d，其余4组BBB评分明显降低，组间比较无统计学差异(p＞0.05)；术后7d，与M组比较，HM组BBB评分明显升高（p＜0.05），IM组BBB评分则明显下降（p＜0.05），IHM组与HM组比较行为学评分下降（p＜0.05）；术后7d与6h相比，M组的大鼠自身前后比较行为学的恢复明显好转(p＜0.05)。<br>　　2、HE染色：S组未见明显的病理变化；其余4组均出现不同程度上的结构破坏。与S组比较，M组脊髓前角灰质严重受损，并且神经元排列紊乱，细胞肿胀、结构变模糊、间隙也增大、胞核固缩、溶解；与M组相比，HM组脊髓前角细胞排列较规则、组织损伤均有不同程度的减轻、而IM组灰质受损情况更为严重，出现明显的细胞肿胀、坏死和凋亡、细胞间隙增大和神经元排列紊乱；与HM组相比，IHM组病理学改变明显更严重。<br>　　3、Nissl染色：S组脊髓结构完整，灰质与白质之间界限清楚，呈蝴蝶状，神经元内可见虎斑状尼氏体。与M组相比，HM组神经元肿胀较轻，神经元形态较好；而IM组神经元破坏最严重，可见明显的空泡样改变；IHM组神经元破坏比HM组严重。<br>　　4、TUNEL染色：S组未见明显的凋亡阳性细胞；相较于S组，M组脊髓前角灰质内有大量的凋亡细胞（p＜0.05）；HM组与M组比较凋亡细胞显著下降（p＜0.05）；与M组比较，IM组凋亡细胞显著增加（p＜0.05）；与HM相比，IHM组凋亡细胞增加（p＜0.05）。<br>　　5、WB：M组与S组比较，BDNF、TrkB、c-caspase3、Bax/Bcl-2表达均增加（p＜0.05）,而MAP-2和PSD95表达均减少（p＜0.05）；与M组比,HM组的BDNF、TrkB、MAP-2、PSD95表达均显著增加（p＜0.05），c-caspase3、Bax/Bcl-2表达均减少（p＜0.05）；IM组的BDNF、TrkB、MAP-2、PSD95表达较M组均下降（p＜0.05），相反c-caspase3、Bax/Bcl-2表达则增加（p＜0.05）；与HM组比较，IHM组的BDNF、TrkB、MAP-2、PSD95表达均下降（p＜0.05），c-caspase3、Bax/Bcl-2表达增加（p＜0.05）。<br>　　6、PCR：M组与S组比较，BDNFmRNA和TrkBmRNA表达量均增加（p＜0.05）；与M组相比较,HM组BDNFmRNA和TrkBmRNA表达量均增加（p＜0.05）；IM组BDNFmRNA和TrkBmRNA表达量较M组均下降（p＜0.05）；与HM组比较，IHM组BDNFmRNA和TrkBmRNA表达量均下降（p＜0.05）。<br>　　7、免疫荧光：SCI术后7d，M组与S组比较，NEUN、MAP-2、PSD95阳性细胞均减少，c-caspase3阳性细胞增加（p＜0.05）；与M组比较，HM组的NEUN、MAP-2、PSD95阳性细胞增加，c-caspase3阳性细胞显著减少（p＜0.05）；IM组与M组比较，NEUN、MAP-2、PSD95阳性细胞显著减少，c-caspase3阳性细胞显著增加（p＜0.05）；与HM组比较，IHM组的NEUN、MAP-2、PSD95阳性细胞减少，c-caspase3阳性细胞增加（p＜0.05）。<br>　　8、Golgi染色：M组与S组比较，树突分支总长度、总交点数和树突棘密度均显著减少（p＜0.05）；HM组树突分支总长度、交点数和树突棘密度较M组增加（p＜0.05）；与M组比较，IM组的树突分支总长度、交点数和树突棘密度均显著减少（p＜0.05）；IHM的树突分支总长度、交点数和树突棘密度较HM组减少（p＜0.05）。<br>　　9、透射电镜：S组神经元结构完整，突触结构清晰，突触数量和突触囊泡多；与M组比较，HM组肿胀减轻，突触结构较清晰；与M组比较，IM组神经元严重水肿，边界不清，突触后膜厚度更加不均匀，突触小泡大量降解，突触连接消失；与HM组比较，IHM组神经元和突触破坏更加严重。<br>　　结论：高压氧治疗减少脊髓前角细胞凋亡和抑制脊髓前角神经元树突/突触退变；BDNF/TrkB信号传导通路参与抗凋亡和抑制树突/突触退变并且具有积极作用；另外，高压氧治疗可以通过上调BDNF/TrkB信号通路减少细胞凋亡和抑制树突/突触退变从而促进神经功能的恢复。