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摘要转录调控在真核生物的基因表达中有着至关重要的作用。研究发现RNA聚合酶Ⅱ(PolⅡ)可以暂停在许多基因的转录起始位点下游30-50bp处。当接受一定刺激后，正性转录延伸因子P-TEFb可磷酸化位于RNAPolⅡ碳端结构域(CTD)中7肽重复序列的2位丝氨酸(Serine 2)，释放PolⅡ，激活转录，进而合成全长mRNA。HEXIM蛋白家族包括HEXIM1和HEXIM2蛋白，两者的序列具有很强的同源性，在功能上也十分相似。HEXIM家族中HEXIM1与HEXIM2蛋白可以以同源二聚体或异源二聚体的形式参与7SKsnRNP的形成。7SKsnRNP复合物可以通过与P-TEFb的结合抑制活性，在转录调控中主要起抑制的作用。然而，两者在转录调控中是否存在功能差异性目前尚不清楚。<br>　　为了探究HEXIM家族两种蛋白在转录调控中的作用，我们首先制备了特异性的识别HEXIM1和HEXIM2的抗体。并且利用CRISPR-Cas9技术分别构建了HEXIM1和HEXIM2敲除的HCT116稳定细胞系，用于后续实验。通过Q-PCR和WesternBlot结果结果显示在RNA和蛋白水平上HEXIM1敲除后HEXIM2的表达上调；而HEXIM2敲除后HEXIM1的表达亦会上调，提示HEXIM1和HEXIM2可能存在功能上的代偿。随后进行的血清饥饿处理研究时发现HEXIM1敲除后C-FOS，C-JUN和EGR1的表达量下调，而HEXIM2敲除后C-FOS和C-JUN的表达量上调。为了进一步探究造成两者差异性的机制，我们通过ChIP实验探究在血清刺激后HEXIM蛋白敲除后对于PolⅡ和AFF4在C-FOS位点的富集情况。结果表明HEXIM1敲除后并不影响PolⅡ和AFF4的富集；而HEXIM2敲除后PolⅡ在启动子和下游基因处的富集均显著增加，而AFF4在启动子处的富集也增加。因此HEXIM1和HEXIM2在分子水平上对C-FOS的调控存在功能差异性；HEXIM2可能通过影响超级延伸复合物(SEC)参与的PolⅡ重新释放的过程。然而，HEXIM1和HEXIM2的具体调控机制还需要进一步的研究。