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摘要目的(1)探讨miR-219a-5p在etoposide损伤及H2O2损伤细胞模型中的表达情况；(2)利用生物信息学筛选出CCNA2和CACUL1是miR-219a-5p的靶蛋白，并探讨蛋白CCNA2和CACUL1在etoposide损伤及H2O2损伤模型中的变化趋势；(3)验证蛋白CCNA2和CACUL1是miR-219a-5p的靶蛋白；(4)探寻特异变化的miR-219a-5p在TBI过程中的作用机制，以期为TBI患者的诊断和治疗提供新思路与新方法。<br>　　方法(1)采用25μmol/Letoposide刺激损伤神经元细胞，并收集在1h,6h,16h,20h,24h时损伤的神经元细胞及对照组细胞内的总RNA。另外，采用150μmol/LH2O2损伤神经元细胞，并提取在6h,12h,18h,24h时损伤的神经元细胞及对照组细胞内的总RNA。实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(quantitative Real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR)分别分析两种TBI损伤模型中的不同时间点的miR-219a-5p变化。(2)通过生物信息学软件预测miR-219a-5p作用的靶蛋白；采用25μmol/Letoposide刺激损伤神经元细胞，并收集损伤后1h,6h,16h,20h,24h时损伤的神经元细胞及对照组神经元细胞内的总蛋白。另外，采用150μmol/LH2O2损伤神经元细胞，并提取损伤后6h,12h,18h,24h时损伤的神经元细胞及对照组神经元细胞内的总蛋白。Westernblot分别分析两种TBI损伤模型中的不同时间点的CCNA2和CACUL1蛋白变化。(3)采用荧光素酶报告基因实验及过表达或抑制表达miR-219a-5p后的蛋白变化验证CCNA2和CACUL1是miR-219a-5p的靶蛋白。(4)Westernblot分析Akt/Foxo3a信号通路及p53/Bcl-2信号通路的表达情况。<br>　　结果(1)etoposide损伤模型中，与对照组相比，miR-219a-5p在6h表达上调(p＜0.05)，并持续升高至24h;H2O2损伤模型中，与对照组相比，miR-219a-5p的表达水平在损伤12h后持续升高(p＜0.05)。(2)生物信息学分析显示蛋白CCNA2和CACUL1是miR-219a-5p的靶蛋白;etoposide损伤模型中，蛋白CCNA2和CACUL1在6h表达下调，并持续降低至24h;H2O2损伤模型中，蛋白CCNA2、CACUL1的表达水平具有相似的变化趋势。(3)荧光素酶报告基因实验证明miR-219a-5p可分别与CCNA2mRNA和CACUL1mRNA的3′-UTR结合；过表达或抑制表达实验再次证明蛋白CCNA2和CACUL1是miR-219a-5p的靶蛋白。(4)etoposide损伤模型中，上调的miR-219a-5p通过抑制蛋白CCNA2和CACUL1的表达，分别进一步调控Akt/Foxo3a及p53/Bcl-2信号通路，进而引起神经元细胞凋亡。<br>　　结论TBI损伤模型中的miR-219a-5p水平升高，且miR-219a-5p负向调控神经元细胞内的靶蛋白CCNA2和CACUL1，进而调控神经元细胞的凋亡。本实验提示，miR-219a-5p可促进TBI发生与发展，也为TBI的诊疗提供了新思路。