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摘要1.了解HBsAg阳性母亲新生儿Th1、Th2型细胞因子的表达水平。<br>　　2.探讨HBsAg阳性母亲HBV复制状态、分娩方式以及新生儿HBV感染、复制状态与新生儿Th1、Th2型细胞因子的关系。<br>　　3.分析新生儿Th2优势应答程度的影响因素及其交互作用，为HBsAg阳性母亲新生儿Th2优势应答机制的研究提供新思路。<br>　　以2011年6月至2013年7月在太原市第三人民医院妇产科分娩的HBsAg阳性母亲及其新生儿323对作为研究对象，面对面调查和病历查阅相结合收集母亲及新生儿的一般情况，采集分娩前母亲肘静脉血3ml及出生后24h内，主、被动免疫前新生儿股静脉血3ml，于-80℃冰箱中保存备检。<br>　　电化学发光法(ECLIA)检测HBV血清学标志物(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)；real-timePCR-TaqMan探针法检测PBMCHBVcccDNA和血清HBVDNA；ProcartaPlex多因子分析技术检测新生儿外周血Th1(IL-2、IFN-γ、TNF-ɑ)和Th2型细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10)水平。以新生儿Th1细胞因子之和与Th2细胞因子之和的比值计算Th1/Th2比值，即按以下公式计算：Th1/Th2=(IL-2+IFN-γ+TNF-ɑ)/(IL-4+IL-6+IL-10)。Th1/Th2比值反映新生儿Th2优势应答程度，若比值越低，则其Th2优势应答程度越高。<br>　　采用病例对照研究的方法探讨新生儿Th2优势应答程度的影响因素。以新生儿Th1/Th2比值中位数为界，将新生儿分为Th1/Th2低比值组(病例组161例)和Th1/Th2高比值组(对照组162例)，单因素分析和多因素非条件logistic回归分析探讨新生儿Th2优势应答程度的影响因素。<br>　　采用Epidata3.1建立数据库，采用SPSS19.0软件进行数据整理和分析，定量资料采用Wilcoxon秩和检验进行分析，定性资料采用趋势χ2检验、χ2检验或Fisher确切概率法进行分析。采用非条件logistic回归模型进行多因素分析，在logistic回归模型中引入影响因素的乘积项进行两个因素的相乘交互作分析，当乘积项系数的P＜0.05，则存在相乘交互作用。通过Andersson等人编制的Excel软件计算相加交互的三个指标超额相对危险度(RERI)、交互作用归因比(AP)和交互作用指数(S)进行相加交互作用的分析，若RERI和AP这两个指标的可信区间包含0，S的可信区间包含1时，认为两因素间不存在相加交互作用。<br>　　结果：<br>　　一、HBsAg阳性母亲及其新生儿的一般情况<br>　　本次研究共纳入323对HBsAg阳性母亲及其新生儿，HBsAg阳性母亲年龄范围在18-45岁之间，平均为(27.59±4.11)岁；孕周平均为(39.04±1.12)周；家庭年收入以3万-5万之间居多(57.28%，185/323)；孕期在职工作的孕妇所占比例较小(24.77%，80/323)；孕妇多无乙肝家族史(71.52%，231/323)；孕期服用抗病毒药物的孕妇较少(13.31%，43/323)；初次孕产的孕妇占比为50.15%(162/323)。新生儿男女性别比为1.14∶1；出生身长范围在46cm-55cm之间，平均为(50.06±1.37)cm；出生体重范围在2500g-5000g之间，平均为(3392±429)g。<br>　　二、HBsAg阳性母亲新生儿Th1、Th2型细胞因子水平及Th1/Th2比值<br>　　HBsAg阳性母亲新生儿Th1型细胞因子(IL-2、IFN-γ和TNF-ɑ)平均水平：IL-2中位数为13.86pg/ml，IFN-γ中位数为1.36pg/ml，TNF-ɑ中位数为1.79pg/ml；新生儿Th2型细胞因子(IL-4、IL-6和IL-10)平均水平：IL-4中位数为8.45pg/ml，IL-6中位数为52.77pg/ml，IL-10中位数为2.03pg/ml。计算HBsAg阳性母亲新生儿Th1型细胞因子与Th2型细胞因子的比值，其中位数为0.19。<br>　　三、HBsAg阳性母亲HBV复制状态与新生儿Th1、Th2型细胞因子的关系<br>　　323例HBsAg阳性母亲血清中HBVDNA阳性率为54.80%(177/323)；血清中HBeAg阳性率52.32%(169/323)；PBMCHBVcccDNA阳性率为17.65%(57/323)。将PBMCHBVcccDNA、HBVDNA和HBeAg进行相关性分析，结果表明：PBMCHBVcccDNA与血清HBVDNA(r=0.43，P＜0.001)以及HBeAg水平均呈正相关(r=0.49，P＜0.001)，血清HBVDNA与HBeAg水平亦呈正相关(r=0.61，P＜0.001)。<br>　　分析母亲复制状态与新生儿Th1、Th2型细胞因子表达水平的关系，结果显示：母亲PBMCHBVcccDNA阳性和阴性者新生儿IL-2(13.96 pg/ml vs 13.86 pg/ml)、IL-6(117.66 pg/ml vs 43.22 pg/ml)、IL-10(2.84 pg/ml vs 1.86 pg/ml)以及Th1/Th2比值(0.12 vs 0.22)水平存在差异，母亲PBMCHBVcccDNA阳性者IL-2、IL-6以及IL-10水平高于阴性者，而Th1/Th2比值明显小于阴性者，且差异有统计学意义(Z=2.12，P=0.034；Z=2.66，P=0.007；Z=1.97，P=0.048；Z=-2.18，P=0.029)。以母亲血清HBeAg和血清HBVDNA载量分组后比较新生儿Th1、Th2型细胞因子水平及Th1/Th2比值，均未发现明显差异(P＞0.05)。<br>　　四、分娩方式与新生儿Th1、Th2型细胞因子水平的关系<br>　　323例HBsAg阳性孕妇中，阴道分娩144例，剖宫产179例，比较HBsAg阳性母亲不同分娩方式组新生儿Th1、Th2型细胞因子水平的差异，结果显示经阴道产分娩的新生儿IL-6(104.73 pg/ml vs 31.22 pg/ml )和IL-10(6.88 pg/ml vs 0.90 pg/ml)明显高于剖宫产新生儿，Th1/Th2比值(0.10 vs 0.34)明显低于剖宫产新生儿，差异均有统计学意义(Z=-4.85，P＜0.001；Z=-10.99，P＜0.001；Z=-6.05，P＜0.001)。<br>　　五、新生儿HBV感染及复制状态与Th1、Th2型细胞因子水平的关系<br>　　323例HBsAg阳性母亲新生儿中，HBsAg阳性率为13.31%(43/323)，HBeAg阳性率为43.65%(141/323)，HBVDNA阳性率为1.55%(5/323)。<br>　　分析新生儿HBV感染及复制与Th1、Th2型细胞因子表达水平的关系，结果显示：与阴性者相比，新生儿HBsAg阳性者TNF-α(1.79pg/ml vs 1.12pg/ml)表达水平升高，IL-10(10.16 pg/ml vs 1.12 pg/ml)表达水平降低，Th1/Th2比值(0.10 vs 0.21)降低，且差异有统计学意义(Z=-2.53，P=0.011；Z=4.00，P＜0.001；Z=-2.22，P=0.027)。以新生儿血清HBeAg和血清HBVDNA分组后比较Th1、Th2型细胞因子及Th1/Th2比值，均未发现显著性差异(P＞0.05)。<br>　　六、新生儿Th2优势应答的影响因素及因素间交互作用分析<br>　　根据新生儿Th1/Th2比值判断新生儿Th2优势应答程度，按中位数0.19分成两组，Th1/Th2低比值组161例和Th1/Th2高比值组162例，Th1/Th2低比值组即病例组，表示新生儿免疫呈Th2强优势应答。比较母儿不同特征时新生儿Th2强优势应答的发生比例，结果显示母亲年龄、受教育程度、家庭年收入、孕期职业、孕周、乙肝家族史、抗病毒药物服用情况及既往孕产史和新生儿出生身长、出生体重、性别及Apgar评分不同组间新生儿Th2强优势应答比例的差异均无统计学意义(P＞0.05)。<br>　　母亲HBV复制状态、分娩方式、新生儿HBV感染及复制状态对新生儿Th2优势应答程度影响的单因素分析，结果显示，经阴道产的新生儿发生Th2强优势应答的比例明显高于剖宫产组，差异有统计学意义(70.14%vs33.52%，χ2=42.81，P＜0.001)；母亲HBV复制、新生儿HBV感染及复制不同组间新生儿发生Th2强优势应答比例的差异无统计学意义(P＞0.05)。<br>　　控制母亲年龄、受教育程度、家庭年收入、孕期职业、孕周、乙肝家族史、既往孕产史、分娩方式、血清HBeAg、HBVDNA及新生儿性别、出生身长、体重、Apgar评分、血清HBsAg，HBeAg和HBVDNA后，母亲PBMCHBVcccDNA阳性新生儿发生Th2强优势应答的风险是母亲PBMCHBVcccDNA阴性新生儿的2.40倍(OR=2.40，95%CI:1.12-5.16)；阴道分娩的新生儿发生Th2强优势应答的风险是剖宫产新生儿的5.49倍(OR=5.49，95%CI:3.15-9.59)。进一步分析母亲PBMCHBVcccDNA和分娩方式的交互作用，结果未显示二者之间存在相乘或相加交互作用。<br>　　结论：<br>　　1.HBsAg阳性母亲PBMCHBV复制状况与其新生儿Th1、Th2水平及比值有关；HBsAg阳性母亲PBMCHBV复制是新生儿发生Th2强优势应答的危险因素，提示HBsAg阳性母亲PBMCHBV复制状态可以一定程度预判新生儿Th2优势应答情况；控制母亲PBMCHBV复制，可能有利于减轻HBsAg阳性母亲新生儿Th2优势应答，提高机体清除病毒的能力。<br>　　2.阴道分娩与HBsAg阳性母亲新生儿Th2型细胞因子升高及Th1/Th2比值降低有关，是新生儿发生Th2强优势应答的危险因素，与剖宫产相比，HBsAg阳性母亲阴道分娩的新生儿Th2优势应答更强，说明对于HBsAg阳性母亲新生儿这一特殊人群，阴道分娩母亲的新生儿呈Th2优势应答，HBsAg阳性母亲分娩方式的选择仍需要进一步的深入研究。<br>　　3.新生儿HBV感染与其Th1型细胞因子水平降低、Th2型细胞因子水平升高及Th2优势应答程度高有关，但未进入多因素logistic模型，相关问题有待进一步研究。