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ATP结合盒转运蛋白在胶原诱导关节炎模型鼠的差异表达及其与血清炎性细胞因子的相关性研究

摘要目的:<br>  通过比较ATP结合盒转运蛋白家族耐药相关蛋白P-gp,BCRP,MRP1和炎性细胞因子IL-1β,IL-2,IL-6,IL-10,TNF-ɑ,IL-17在不同病变程度(collagen-induced arthritis ,CIA)模型鼠的差异表达,探讨炎性细胞因子与ABC转运蛋白表达调控的相关性。<br>  方法:<br>  建立Ⅱ型胶原诱导的小鼠CIA模型,将造模成功的14只小鼠于初次免疫后7周处死取材。根据滑膜病理评分将CIA组分为轻度病变组、中重度病变组,选取4只健康小鼠作为正常对照组。采用反转录(RT)-PCR检测脾淋巴细胞中的P-gp,BCRP,MRP1的mRNA表达水平。通过CBA技术检测血清中IL-1β,IL-2,IL-6,IL-10,TNF-ɑ,IL-17的水平。进一步分析不同炎性细胞因子与耐药蛋白的相关性及其浓度依赖性,选出最具相关性的蛋白进行关节滑膜免疫组化定位分析。<br>  结果:<br>  1.三组IL-6相比,中重度CIA组[45.03(38.87, 64.02)]明显高于轻度CIA组[25.31(15.15, 29.27)]、健康对照组[7.75(5.14, 9.17)],(Z=14.383,P<0.05),两两比较,中重度CIA组与轻度CIA组相比,有统计学差异(Z=-7,P<0.05);三组TNF-α相比,相较于健康对照组[22.81(20.84, 28.17)],轻度CIA组[45.00(32.76, 58.51)]、中重度[45.00(39.78, 58.95)]CIA组均升高(Z=8.375,P<0.05),两两比较,中重度CIA组与轻度CIA组相比,无明显差异(Z=-0.381,P>0.05)。IL-1β,IL-2,IL-10,IL-17水平在三组间均无明显差异。2.脾淋巴细胞三种耐药蛋白的mRNA表达水平:三组MRP1mRNA比较,中重度CIA组[2.07(1.77, 2.22)]明显高于轻度CIA组[1.32(1.08, 1.49)]、健康对照组[1.08(0.65, 1.30)],(Z=12.634,P<0.05),两两比较,中重度CIA组与轻度CIA组相比,有统计学差异(Z=-2.582,P<0.05)。P-gp,BCRP的mRNA无统计学差异。MRP1与P-gp有相关性(r=0.635,P=0.015)。3.MRP1mRNA的表达与IL-6有相关性,且呈正相关(r=0.711,P=0.004)。4.不同水平IL-6组MRP1mRNA的表达:健康对照组、低水平IL-6组、高水平IL-6组的MRP1表达分别是:1.08(0.65,1.30),1.40(1.13,2.07),1.90(1.68,2.17),MRP1的表达与IL-6有一定浓度依赖性。5.与健康对照组相比,轻度CIA组踝关节滑膜组织细胞胞质/胞膜呈淡黄色,即弱阳性;中重度CIA组踝关节滑膜组织细胞胞质/胞膜呈棕黄色,即强阳性。<br>  结论:<br>  在CIA关节炎模型中,ABC转运蛋白家族中MRP1表达与滑膜病变严重程度相关,且其与血清中炎性因子IL-6水平高度相关。

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