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KIAA1522在肝癌中的表达、临床意义与生物学功能研究

摘要目的:1.研究KIAA1522在肝癌组织与癌旁组织的表达差异。分析肝癌患者肿瘤组织KIAA1522表达水平与患者临床病理学特征的关系,探讨该基因在预后生存中的意义。<br>  2.研究KIAA1522在肝癌发生、发展、转移中的作用以及相关机制。<br>  方法:1.使用生物信息学分析工具KMplotter和UALCAN研究TCGA数据库中374位肝癌患者组织样本KIAA1522的表达情况并探讨其临床意义。<br>  2.收集10例肝癌样本及其配对癌旁样本,qPCR检测肝癌组织与癌旁组织KIAA1522mRNA的表达水平。对含有90对肝癌样本及配对癌旁样本的组织芯片进行免疫组化染色,分析KIAA1522蛋白表达与患者临床病理学特征的关系以及该基因在预后生存中的意义。<br>  3.通过小RNA干扰敲降肝癌细胞中KIAA1522的表达,并且通过CCK-8法、细胞周期检测、划痕实验以及Transwell实验进一步探讨KIAA1522在肝癌细胞增殖、细胞周期、转移和侵袭中的作用,并通过Western-blot检测PI3K-AKT信号通路重要分子变化。<br>  结果:1.TCGA数据库分析表明KIAA1522在肝癌组织中表达升高(P<0.05),且其表达水平与肿瘤分级密切相关(P<0.05)。KIAA1522高表达患者其总生存率,无病生存率,无进展生存率,疾病特异性生存率均明显低于该基因低表达的肝癌患者(P=0.0013,0.00046,0.00085,0.00035)。<br>  2.临床样本qPCR及免疫组化均证实KIAA1522在肝癌组织中表达上调(P<0.05),进一步分析还证实KIAA1522表达水平与肿瘤分级密切相关(P<0.05),高表达患者预后差(P<0.05)。<br>  3.通过Western-blot我们发现Hep-G2和SK-Hep-1细胞中KIAA1522表达水平较高。敲低Hep-G2和SK-Hep-1细胞中KIAA1522表达,我们发现肝癌细胞增殖减慢、处于G1期的细胞比例增加,划痕实验中细胞迁移的距离减少,Transwell实验中细胞穿过微孔膜的数目减少。此外,Western-blot也证实p-PI3K p85、p-AKT表达降低。<br>  结论:1.KIAA1522在肝癌患者肿瘤组织中表达上调。<br>  2.KIAA1522在肝癌患者肿瘤组织中的表达水平与肿瘤分级密切相关,且肿瘤组织KIAA1522高表达患者生存期短、预后差。<br>  3.敲低KIAA1522可以抑制肝癌细胞的增殖、侵袭和转移能力,PI3K-AKT信号通路可能是其发挥生物学功能的具体机制。

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