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摘要中性粒细胞作为机体重要的固有免疫细胞，可通过吞噬、释放细胞因子等方式，发挥免疫防御和免疫调节等作用。2014年有研究显示，在蜕膜组织中存在一群少量的、具有中性粒细胞表型的功能独特的细胞群，称作蜕膜中性粒细胞（decidual neutrophils，dNs）。dNs可通过免疫抑制介导母-胎界面免疫耐受，但其表面特征分子仍未确定。激活素A（Activin A）属于TGF-β超家族细胞因子，也是重要的性激素调节蛋白。课题组前期研究发现，Activin A可以调控人及小鼠中性粒细胞活性，且根据激活素IIA型受体（ActRIIA）表达情况，可将小鼠中性粒细胞分为ActRIIA+（IIA+）及ActRIIA-（IIA-）两个亚群。但是，妊娠过程中子宫蜕膜组织IIA+中性粒细胞亚群动态变化及其与妊娠相关疾病流产的关系仍不清楚。<br>　　因此，本研究通过建立正常妊娠和流产模型小鼠，检测外周血及子宫蜕膜组织Activin A水平以及IIA+中性粒细胞亚群动态变化，以期阐述IIA+中性粒细胞亚群在妊娠维持中的作用。<br>　　方法：<br>　　（1）采用流式细胞术检测人和小鼠外周血及小鼠子宫蜕膜组织中性粒细胞比例。<br>　　（2）采用ELISA法检测正常妊娠及流产模型小鼠血浆Activin A水平。<br>　　（3）采用RT-PCR和免疫组织化学染色，检测小鼠子宫蜕膜组织ActivinβA mRNA及Activin A蛋白表达水平。<br>　　（4）采用微流控技术检测Activin A对小鼠中性粒细胞迁移的影响。<br>　　（5）采用流式细胞术分选IIA+及IIA-中性粒细胞，并用ELISA法检测中性粒细胞亚群培养上清中细胞因子TNF-α及TGF-β水平。<br>　　结果：<br>　　（1）人及小鼠外周血均存在IIA+及IIA-中性粒细胞亚群。<br>　　（2）与正常雌性未孕BALB/c小鼠相比，Ed6.5、8.5妊娠小鼠血浆Activin A水平及子宫蜕膜组织ActivinβA、ActRIIA和ActRIIB mRNA水平均显著升高；免疫组织化学染色表明Ed4.5、6.5妊娠小鼠子宫蜕膜组织Activin A蛋白水平也明显升高。<br>　　（3）与正常雌性未孕BALB/c小鼠相比，妊娠早期小鼠外周血中性粒细胞比例在Ed6.5有一过性升高，而IIA+中性粒细胞亚群比例随孕期增加而增加，且IIA+亚群变化趋势与外周血Activin A水平变化相似；妊娠早期小鼠子宫蜕膜组织中性粒细胞数量及IIA+中性粒细胞亚群比例均明显升高。<br>　　（4）与同孕龄妊娠小鼠相比，LPS诱导的流产模型小鼠血浆Activin A水平及子宫蜕膜组织ActivinβA mRNA表达水平均显著下降。<br>　　（5）与同孕龄妊娠小鼠相比，LPS诱导的流产模型小鼠及CBA/J×DBA/2自发流产模型小鼠子宫蜕膜组织IIA+中性粒细胞亚群比例均明显下降。<br>　　（6）Activin A可明显抑制fMLP诱导的中性粒细胞迁移。<br>　　（7）体外培养的小鼠IIA-中性粒细胞以分泌促炎因子TNF-α为主，而IIA+中性粒细胞则产生高水平免疫抑制因子TGF-β。<br>　　结论：<br>　　综合上述结果，Activin A作为一种重要的性激素调节蛋白和TGF-β超家族细胞因子，在妊娠期子宫蜕膜组织中高水平表达，其可能是抑制外周循环中性粒细胞向妊娠期子宫蜕膜组织迁移的关键因子。人和小鼠均存在IIA-和IIA+中性粒细胞亚群，且IIA+较IIA-中性粒细胞产生更高水平的免疫抑制因子TGF-β，表明IIA+中性粒细胞属于免疫抑制型亚群。正常妊娠及流产小鼠子宫蜕膜组织IIA+中性粒细胞亚群比例变化，表明IIA+中性粒细胞不仅在妊娠早期子宫蜕膜组织局部免疫微环境维持中发挥重要作用，其比例变化对辅助诊断妊娠相关疾病流产也具有重要意义。