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摘要结核病（Tuberculosis，TB）是由于结核杆菌（Mycobacterium Tuberculosis，MTB）而引起的慢性致死性传染病，可侵犯全身脏器，严重威胁人类的身体健康。近年来，伴随人口流动的加速，用药不合理以及抗结核药物作用靶点的突变，导致耐多药结核病（MDR-TB）和广泛耐药结核病（XDR-TB）的不断出现，再加上近年来患有艾滋病（AIDS）人口数量的增长，结核病与人类免疫缺陷病毒（HIV）并发发病率急剧上升，给结核的治疗带来了严峻的挑战。因此，研发新型抗结核药物成为控制和治疗结核病的迫切要求。<br>　　我国中药来源丰富，品种繁多，天然无污染可再生，毒副作用低且不易产生耐药性，这使中药在日益严重的形势下具有一定的优势。本课题利用贵州中草药资源的多样性，以及民族医药文化的独特性，通过前期活性筛选，发现贵州地道药材独山瓜馥木具有抗结核杆菌活性。对独山瓜馥木乙醇提取物（600g）进行分段萃取，得到石油醚部位（80g）、乙酸乙酯部位（80g）、二氯甲烷部位（120g）以及剩余物（250g）四个部分。通过活性追踪，结果显示石油醚部位、乙酸乙酯部位以及剩余物的最小抑菌浓度（MIC）值均大于160μg/mL，视为无效，而二氯甲烷部位MIC值为160μg/mL，确定二氯甲烷萃取物为活性部位。将二氯甲烷部位采用硅胶柱色谱继续分离，得到Fr.A~Fr.G共7个组分。其中仅有Fr.C和Fr.D对结核杆菌的MIC范围在100~200μg/mL，但Fr.C比Fr.D活性稍高。随后，通过薄层色谱（TLC）和硅胶柱层析对Fr.C组分进行多次纯化，分离得到具有抑制结核杆菌活性化合物GF-01（16mg），对结核杆菌的MIC为80μg/mL。化合物GF-01为白色粉末状，溶于二氯甲烷和甲醇；能使改良碘化铋钾生物碱显色剂呈红色，说明活性单体为生物碱类化合物；能使酸化的氯化铁溶液呈红色，表明活性单体含S元素。综合波谱分析数据并结合参考文献对照，鉴定化合物为3-（6-羟基-9-氧代-9H-芴-1-基）丙硫酰肼。Fr.D组分具有抗结核活性，但由于其极性较大，仅依靠常规的硅胶柱分离技术难以达到理想结果。为了明确其主要化合物种类，故该组分选用分离效能高、灵敏度高的LC-MS手段进行分离，对含量较高的2个化合物进行MS分析，表明Fr.D组分主要由化合物GF-02（2-硫氧-2，3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酰胺）和化合物GF-03（邻苯二甲酐）组成。<br>　　为初步揭示化合物GF-01的作用靶点，首先运用分子对接技术将该分子与结核杆菌相关靶点进行虚拟对接，结果显示UDP-吡喃半乳糖变位酶为潜在靶点。然后采用荧光定量PCR技术，测定结核杆菌UDP-吡喃半乳糖变位酶基因（glf）转录水平，对靶点进行初步验证。结果显示，与空白对照比较，被单体化合物GF-01干预后的结核杆菌的基因glf表达量出现下调，其2???值是空白对照的0.36倍，提示活性化合物对UDP-吡喃半乳糖变位酶无抑制作用，而可能是galE1或glfT的抑制剂。