检索历史 清除

摘要目的：（1）观察早产大鼠肺组织病理学改变,USP7及Wnt信号通路分子β-catenin、α-SMA的表达，以及经USP7特异性抑制剂P5091干预后，上述因子的表达变化。(2）探讨USP7及Wnt信号通路中关键因子在高氧暴露肺组织中的表达及意义。<br>　　方法：建立早产大鼠高氧暴露肺损伤动物模型。将180只新生早产Wistar大鼠完全随机化均分成四组，每组为45只，分别为空气对照组A组：FiO221%+NS、空气干预组B组：FiO221%+P5091、高氧对照组C组：FiO275%+NS及高氧干预组D组：FiO275%+P5091。分别于实验过程第3d、5d、9d时每组随机麻醉处死15只早产鼠取材，一部分用于制作HE染色病理切片观察肺组织病理变化，另一部分用于逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测肺组织中USP7、β-catenin mRNA表达以及蛋白免疫印迹（Western blot）技术检测肺组织中USP7、β-catenin及α-SMA蛋白表达水平。<br>　　结果：（1）肺组织病理学改变：空气3d、5d、9d组（包含对照组和干预组）肺泡发育良好，形态结构基本正常，大小均一，且肺泡数量逐渐增多。高氧对照组3d可见肺泡明显压缩、结构紊乱，可见明显炎症细胞、红细胞渗出及间质水肿改变；5d时肺泡结构紊乱，血管排列失调，间质水肿稍减轻，仍可见较多的炎症浸润及出血样改变；9d可见正常肺泡结构消失，有融合、断裂现象，结构重塑，毛细血管少，肺泡间隔明显增厚。高氧干预组3d组肺泡结构紊乱，肺泡压缩、炎症细胞浸润及出血、间质水肿程度均较高氧对照组减轻；5d组炎症浸润及出血情况减轻，肺泡结构排列较前规律；9d组肺泡结构大小相对较均匀，肺泡间隔明显增宽。（2）肺组织USP7、β-catenin mRNA表达：在3d、5d、9d肺组织中，与A组相比，C组USP7、β-catenin mRNA表达均显著增加（P<0.01），B组USP7、β-catenin mRNA表达均无明显差异（P>0.05）；与B组相比，3d、5d的D组中USP7mRNA表达显著增加（P<0.01），β-catenin mRNA表达明显增加（P<0.05），9d的D组中USP7、β-catenin mRNA表达均明显增加（P<0.05）；与C组相比，D组中β-catenin mRNA表达均明显减少（P<0.05），USP7mRNA表达均无明显差异（P>0.05）。（3）肺组织USP7、β-catenin、α-SMA蛋白表达：在3d、5d、9d肺组织中，与A组相比，对应的C组USP7、β-catenin、α-SMA蛋白表达均明显增加（P<0.01），B组USP7、β-catenin、α-SMA蛋白表达均无明显差异（P>0.05）；与B组相比，3d的D组中USP7、β-catenin、α-SMA蛋白表达均明显增加（P<0.01），5d的D组中β-catenin蛋白表达显著增加（P<0.01），USP7、α-SMA蛋白表达均明显增加（P<0.05），9d的D组中USP7、β-catenin蛋白表达均显著增加（P<0.01），α-SMA蛋白表达明显增加（P<0.05）；与C组相比，对应的D组中β-catenin、α-SMA蛋白表达均明显减少（P<0.05），USP7蛋白表达无明显差异（P>0.05）。<br>　　结论：（1）高氧暴露可激活Wnt/β-catenin信号通路。（2）USP7可能通过Wnt/β-catenin信号通路来参与高氧肺损伤。（3）USP7特异性抑制剂P5091可能通过加强β-catenin的泛素化来加速其降解，减少肺上皮-间质转化，从而对高氧肺损伤具有一定的保护作用。