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山蜡梅花萃取物的抗氧化和灭螺活性研究

摘要山蜡梅(Chimonanthus nitens Oliv.)是中国特有的中草药,分布广泛,资源丰富,其根、茎、叶、花蕾和果均可入药,是传统的庭院名花和民间用药,具有巨大的开发前景。福寿螺(Pomacea canaliculata Lamarck)是世界100种恶性外来入侵物种之一,对农业、经济和人身体健康都有严重的危害。如何有效防控福寿螺带来的危害,已经成为全社会关注的问题。本文以山蜡梅的花为实验材料,取干燥的山蜡梅花粉末用体积分数为70%乙醇超声波辅助冷浸提取,乙醇提取物用石油醚、乙酸乙酯和水饱和正丁醇依次萃取,得到石油醚萃取物(PEEE)、乙酸乙酯萃取物(EAEE)和水饱和正丁醇萃取物(SBEE)。对山蜡梅花不同萃取物的抗氧化活性和对福寿螺的灭螺活性进行了筛选,从中挑选灭螺活性最好的组分研究其致死率分别为25%、50%和75%时福寿螺体内的生理生化变化以及肝脏组织的受损情况及对生理生化的影响,阐明灭螺活性组分的作用机理,为山蜡梅花的进一步开发利用提供科学的理论依据。<br>  体外抗氧化活性研究结果表明:山蜡梅花的PEEE、EAEE和SBEE对DPPH自由基和ABTS+自由基均具有清除作用,对α-葡萄糖苷酶和酪氨酸酶有一定的抑制作用,其中EAEE的抗氧化活性最强,通过总酚和总黄酮含量的测定,山蜡梅花PEEE、EAEE和SBEE中均含有酚类和黄酮类物质,其中EAEE中的酚类物质和黄酮含量均是最高的,总黄酮为9.33mg/g,总酚为2.93mg/g。<br>  灭螺活性研究结果表明:山蜡梅花的PEEE、EAEE和SBEE对福寿螺都具有一定的毒杀作用,其中PEEE的灭螺活性最强(24h,IC50=0.287mg/mL)。将福寿螺暴露于不同浓度PEEE中24h后,肝脏表面整体松散,内部组织出现大面积坏死,损伤严重;肝细胞内粗面内质网数量减少,出现了肿胀、断裂和脱颗粒等现象;线粒体数量减少,出现形状不规则肿胀;肝脏内可溶性糖、可溶性蛋白和白蛋白(Alb)的含量随PEEE浓度的升高而降低,而谷丙转氨酶(GPT),谷草转氨酶(GOT)和乙酰胆碱酯酶(AchE)活性随PEEE浓度的升高而升高。通过GC-MS分析,从山蜡梅花的PEEE中共鉴定出29种化合物,其中主要成分是酯类(48.13%)、醇类(18.43%)和蜡梅碱(14.70%)。

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