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储存时间和温度对低温等离子体激活液诱导肿瘤细胞凋亡的影响

摘要目的:本研究将低温等离子体激活液(CPS)分别在不同条件下储存后对黑素瘤细胞(A375)、鳞癌细胞(A431)、基底癌细胞(TE354T)和角质形成细胞(HaCat)进行处理,通过测定四种细胞的活力和凋亡率来评价储存条件对CPS活性的影响,从而寻找出CPS最佳的储存条件。<br>  方法:我们使用的等离子体装置为空气源介质阻挡放电(Dielectric Barrier Discharge,DBD)装置,输出功率为15W,液体介质为DMEM完全培养基(10%胎牛血清,1%青霉素/链霉素溶液),处理时间为90s,制备成CPS,通过移液管将CPS转移到15mL离心管中。然后我们将制备的CPS分别在20℃、4℃、-20℃下储存24h、72h、1周、2周、4周;我们再利用储存后的CPS分别对黑素瘤细胞(A375)、鳞癌细胞(A431)、基底癌细胞(TE354T)和角质形成细胞(HaCat)进行处理,最后利用MTT比色法检测细胞的存活率及Annexin-V-PI双染法检测细胞凋亡率,并利用分光光度计对CPS中的H2O2、NO2-、O3进行检测。<br>  结果:实验的结果显示CPS活性与储存时间和温度显着相关。随着储存时间的增加,CPS的抗肿瘤作用逐渐降低。与20℃和4℃下储存的CPS相比,-20℃下储存的CPS具有最大的抗肿瘤作用,活性物质的损失最低。此外,实验结果还表明,黑素瘤细胞(A375)、鳞癌细胞(A431)、基底癌细胞(TE354T)对CPS的敏感性不同,并且CPS对正常细胞的影响较小。<br>  结论:CPS的活性与储存温度和时间有关,且在-20℃条件下储存其效能的损失最小,该研究结果为将来CPS储存条件提供了参数,并证明了其可作为将来治疗皮肤肿瘤的可行方法。

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