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摘要背景<br>　　近年来，慢性肾脏病的患病率在国内外呈逐年上升的趋势，已然成为了困扰全球的公共卫生问题。蛋白尿是慢性肾脏病发生发展的独立危险因素，如何缓解蛋白尿水平对于慢性肾脏病患者的预后至关重要。足细胞损伤是蛋白尿产生的重要原因，也是多种慢性肾脏病的共同发病机制。既往课题组和国内外研究发现活化T细胞核因子胞浆1型(Nuclear factor of activated T-cells cytoplasmic 1，NFATc1)是参与足细胞损伤的关键因子，其机制可能是通过介导下游靶基因的转录促进足细胞凋亡及肾小球硬化。转录因子Kr?ppel样因子15(Kr?ppel-like factor 15，KLF15)是转录因子KLFs家族一员，KLF15可以促进足细胞分化，增强糖皮质激素的治疗效果，但其保护足细胞的具体机制仍有待阐明。<br>　　目的<br>　　本研究通过体外培养的足细胞，探究KLF15对足细胞的保护作用，KLF15对NFATc1的调控作用、KLF15是否通过NFATc1保护足细胞以及糖皮质激素是否通过KLF15影响NFATc1保护足细胞。<br>　　方法<br>　　1、免疫荧光染色观察正常肾组织及肾小球疾病患者肾组织中KLF15的表达情况；2、体外培养的足细胞，以阿霉素(ADR)培养24小时，脂多糖(LPS)、高糖(30nmol/L)培养48小时，通过RT-PCR、westernblot观察足细胞KLF15的mRNA及蛋白的表达；3、体外培养的足细胞，通过腺病毒转染的方式过表达KLF15，通过RT-PCR及westernblot观察KLF15的mRNA及蛋白水平过表达效率、促凋亡蛋白Bax、抗凋亡蛋白Bcl-2的mRNA及蛋白水平表达，通过Annexin-Ⅴ/PI双染色后流式细胞术检测足细胞凋亡情况；4、体外培养的足细胞通过siRNA转染沉默KLF15，通过RT-PCR及westernblot检测KLF15的mRNA及蛋白水平沉默效率，通过Annexin-Ⅴ/PI双染色后流式细胞术检测足细胞凋亡情况；5、体外培养的足细胞过表达及沉默KLF15后，通过RT-PCR及westernblot检测NFATc1的mRNA及蛋白表达，通过染色质免疫共沉淀及荧光素酶报告实验检测KLF15与NFATc1启动子结合情况；通过RT-PCR检测NFATc1下游靶基因的mRNA表达；6、体外培养的足细胞，在含10nmol/L地塞米松的培养基中培养0小时、6小时、12小时、24小时、48小时，通过RT-PCR检测KLF15的mRNA表达，通过RT-PCR及westernblot检测NFATc1的mRNA及蛋白水平表达，沉默KLF15联合地塞米松处理后NFATc1的mRNA及蛋白水平表达。<br>　　结果<br>　　1、KLF15在肾小球疾病患者的足细胞中表达降低；2、体外培养的足细胞，在ADR、LPS、HG损伤处理后，KLF15的表达降低；3、体外培养的足细胞过表达KLF15后，促凋亡蛋白Bax表达降低、抗凋亡蛋白Bcl-2表达升高，足细胞凋亡降低，且在过表达KLF15联合ADR、LPS、HG损伤刺激后足细胞凋亡降低；4、体外培养的足细胞，沉默KLF15后，足细胞凋亡增加，加入NFATc1抑制剂11R-VIVIT及沉默NFATc1后，足细胞凋亡降低；5、体外培养的足细胞过表达KLF15后，NFATc1表达降低，沉默KLF15后，NFATc1表达升高，且KLF15与NFATc1的启动子结合，过表达KLF15后，NFATc1的下游靶基因表达降低，沉默KLF15后，NFATc1的下游靶基因表达升高；6、体外培养的足细胞，经地塞米松处理后，KLF15的表达升高，NFATc1的表达降低，且沉默KLF15后，NFATc1的表达无明显变化。<br>　　结论<br>　　KLF15对于足细胞是一个保护性因子，KLF15通过与NFATc1启动子结合抑制NFATc1的表达起到保护足细胞作用，KLF15-NFATc1通路参与地塞米松调控足细胞损伤的作用机制。