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一个DOG1互作蛋白参与调控种子干燥耐受和休眠的机制研究

摘要种子是植物生命循环的起始,种子顺利萌发是植物生长发育的基础。种子发育中会经历受精、形态发生、成熟干燥等过程。种子干燥耐受建立过程对下一阶段的萌发具有重要影响。萌发活力正常的种子在适宜的条件下仍然不能萌发的现象称为休眠。在农业生产中,过强的休眠会影响萌发速度和均一性,过弱的休眠也会导致萌发提前,甚至收获前发芽,降低产量和质量。因此,研究调控种子干燥耐受建立和种子休眠的机制,进而通过分子育种改善种子质量,对农业生产具有重要意义。DOG1(Delay of Germination 1)是控制种子休眠的一个主效基因,该基因在种子中特异性表达,其表达量决定种子休眠程度。但是DOG1的作用机制仍很不清楚。我们在前期研究中发现一个表达模式与DOG1相似的基因,该基因也在拟南芥种子成熟过程中表达,并且其表达受渗透压诱导,暗示其可能参与种子干燥耐受和休眠的建立。我们通过蛋白相互作用分析,发现二者之间存在互作。我们将该基因编码的蛋白称为DOG1的互作蛋白DIP(DOG1 Interaction Protein)。我们进一步通过转基因植株表型分析、生化及遗传学手段分析了DIP通过与DOG1互作调控种子干燥耐受建立和种子休眠的机制,并探究了种子休眠与种子干燥耐受性之间的联系。以下是我们的主要研究结果:<br>  1.通过分析dog1-3、dip突变体植株种子的萌发表型发现,DIP对萌发具有促进作用。<br>  2.通过dog1-3、dip-1突变体种子的激素敏感性实验发现,DIP和DOG1一样,不是特异地参与ABA/GA调控种子休眠的信号通路。<br>  3.DIP基因受到渗透压诱导,我们分析了dog1-3、dip-1突变体种子的干燥耐受性,发现DIP促进种子干燥耐受的建立,而DOG1起抑制作用,DOG1能负调控DIP的表达,因此,DOG1可能位于DIP上游调控种子干燥耐受建立过程。<br>  4.通过对dip-1突变体种子中DOG1的蛋白水平分析发现,DIP能够抑制DOG1蛋白的表达,从而调控种子休眠。<br>  5.通过分析大豆中DOG1和DIP同源蛋白及它们之间的互作,发现在大豆中DOG1同源基因编码的蛋白保留有DOG1保守结构域,并且DOG1和DIP同源蛋白之间也存在相互作用。因此我们推测大豆中DIP同源基因的功能是保守的。<br>  综上所述,DIP是一个在种子成熟过程中表达的蛋白,其能促进种子干燥耐受的建立,并能通过与DOG1的互作调控种子中DOG1蛋白的积累进而调控种子休眠。以上结果揭示了DOG1调控种子休眠的新的机制,从分子层面上为种子干燥耐受的建立和种子休眠之间的联系提供了新的解释。

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