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摘要目的：肾透明细胞癌由于其胞浆丰富并含有大量的糖原和脂质，在光镜下呈均质透明状而得名。在肾透明细胞癌的发生和发展过程中通常伴随着糖代谢、氨基酸代谢以及脂质代谢的异常，而这一过程被称为代谢重编程。本课题组前期通过对组织样本进行脂质组学检测发现，以中长链脂肪酸为主要成分的脂质在肾癌组织中表达上调，而在转移性肾癌组织中表达进一步上调，但其具体调控机制尚未完全阐明。胆固醇调节元件结合蛋白1（Sterol-regulatory element binding protein1，SREBP1）作为转录因子，对脂肪酸的从头合成途径起到调控作用。通过生物信息学分析发现，细胞周期转录因子E2F1可能靶向作用于SREBP1的编码基因SREBF1。因此，本次研究旨在验证E2F1通过调控SREBP1诱导肾透明细胞癌脂代谢重编程和恶性进展的可能机制，为在临床上发现有效的预测指标和治疗靶点提供基础。<br>　　方法：①将10例癌旁正常肾组织样本和28例透明细胞肾癌组织样本（20例非转移性肾癌、8例转移性肾癌）进行脂质组学检测，并分析各组间表达差异明显的脂质成分（P＜0.05）；通过生物信息学分析筛选出调控脂肪酸从头合成途径的关键因子SREBP1及其可能的上游转录因子E2F1。②扩大样本量（n=147），基于组织样本，分别利用qRT-PCR和western blot检验E2F1和SREBP1在mRNA水平和蛋白水平的表达量以及共变关系；通过免疫组化和油红O染色，评估E2F1和SREBP1的表达水平与肾透明细胞癌脂质聚积的相关性。③基于透明细胞肾癌细胞系786-O和Caki-1，通过ChIP实验和荧光素酶报告实验验证E2F1对SREBP1的调控作用；通过质谱分析和油红O染色验证E2F1和SREBP1对肾癌细胞脂代谢异常的调控作用；通过细胞功能试验验证E2F1和SREBP1对肾癌细胞增殖、侵袭以及迁移等生物学行为的调控作用。④基于裸鼠肾脏原位移植瘤模型，利用荧光活体成像系统，动态监测E2F1和SREBP1对肾癌生长和转移的作用，以及应用SREBP1抑制剂后对肿瘤恶性进展以及裸鼠存活时间的影响。⑤将透明细胞肾癌组织样本中E2F1和SREBP1的表达水平与患者的临床病理数据以及随访资料进行相关性分析和预后分析。<br>　　结果：①脂质组学结果显示以中长链脂肪酸为主要成为的脂质在肾癌中表达上调，并且在转移性肾癌中进一步上调。②在肾癌及癌旁组织中检测E2F1和SREBP1在mRNA和蛋白水平的表达量，结果表明SREBP1在肾癌中表达上调，并且在转移性肾癌中进一步上调，E2F1与SREBP1的表达量呈正相关。③免疫组化和油红O染色结果显示，E2F1和SREBP1的表达量与肾透明细胞癌的脂质含量呈正相关。④ChIP实验和荧光素酶报告实验结果显示，E2F1可靶向作用于SREBF1的启动子区，正向调控SREBP1的表达。⑤对透明细胞肾癌细胞系进行质谱分析，结果提示E2F1可通过SREBP1促进肾癌细胞内中长链脂肪酸含量的增加。⑥MTS实验、划痕实验、平板克隆实验以及细胞侵袭和迁移实验结果提示，E2F1可通过SREBP1促进肾癌细胞的增殖、侵袭以及迁移能力。⑦裸鼠肾脏原位移植瘤实验结果表明，E2F1可显著促进原位肿瘤的生长及肺部转移，而应用SREBP1抑制剂则可逆转上述过程，起到抑制肿瘤生长和转移的作用。⑧结合透明细胞肾癌患者的临床病理学资料及其E2F1和SREBP1的表达量进行多因素二元逻辑回归分析和生存分析，发现E2F1和SREBP1的同时高表达是肾癌患者疾病恶性进展和死亡的独立危险因素，提示预后不良。<br>　　结论：①在肾透明细胞癌中，E2F1可靶向作用于SREBF1的上游启动子区，并正向调控SREBP1的表达。②E2F1和SREBP1可通过影响脂代谢相关下游靶基因促进肾癌细胞的脂肪酸从头合成途径和脂质沉积。③E2F1和SREBP1可通过影响细胞周期和上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transformation，EMT）相关下游靶基因促进肾透明细胞癌的增殖、侵袭和迁移能力。④SREBP1抑制剂可有效抑制肾透明细胞癌的原位生长和远处转移并改善预后。⑤E2F1和SREBP1的同时高表达是肾透明细胞癌患者疾病恶性进展和死亡的独立危险因素，提示预后较差。因此，SREBP1在将来有望成为肾透明细胞癌新的预后指标和治疗靶点。