检索历史 清除

摘要实验目的：<br>　　脓毒症是全球重要的健康问题之一，目前病死率仍然很高。脓毒症的发病机制涉及到许多的因素，其中炎症反应的过度激活导致的血管内皮细胞损伤是脓毒症的主要病理生理特征之一。脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）是革兰阴性细菌的细胞壁中外壁的组成成份之一，其主要由脂质和多糖共同构成。脂多糖可以随着外伤、细菌感染等因素进入人体的循环系统之中，随后通过激活NF-κB等多种细胞信号传导途径，进而诱导炎症因子和细胞间粘附分子的大量表达，最终引起机体内皮细胞的功能发生损伤。姬松茸又名小松菇、巴西蘑菇，是属于担子菌纲、伞菌目的一种传统医药和保健食品，具有调节免疫功能、提高机体消化系统、心血管功能等多种药用功能。姬松茸多糖(Agaricus Blazei Polysaccharide，ABP)是从优质姬松茸实体内提取的有效生物活性成分，相关研究证明了其具有抗肿瘤增殖、降低血糖、抗炎症反应等多种生物学功能。目前关于姬松茸多糖药用价值的研究大多数集中在其抗肿瘤增殖、参与机体免疫功能的调节等方面，但是对于姬松茸多糖对机体内的炎症反应导致对的内皮细胞功能损伤是否具有潜在的治疗作用，目前尚无相关的实验研究进行报道。本课题拟研究并探讨姬松茸多糖（ABP）对脂多糖（LPS）诱导的人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）损伤的保护作用及其具体的相关分子机制。<br>　　实验方法：<br>　　本实验通过以体外培养的HUVECs为实验对象，分为Control组、LPS组（1μg/ml）、ABP（10μg/ml、20μg/ml、50μg/ml）+LPS组等5组。预处理：①Control组和LPS组：分别加入等量的细胞培养基；②ABP组：分别加入含有不同浓度的ABP（10μg/ml、20μg/ml、50μg/ml）的细胞培养基预处理24h；预处理结束后：①Control组：在培养皿中加入等量的细胞培养基培养24h；②LPS组和ABP+LPS组：在培养皿中加入含有LPS的等量细胞培养液培养24h；通过CCK-8法检测ABP对于HUVECs的细胞毒性作用，ELISA法、Western Blot法以及RT-PCR法检测HUVECs中炎症因子及细胞粘附分子的表达变化，Western Blot法和免疫荧光法检测HUVECs中NF-κB信号通路相关蛋白的变化。<br>　　实验结果：<br>　　在本实验中，我们发现ABP对LPS诱导的HUVECs损伤具有一定的保护作用。即ABP在一定程度上可以抑制由LPS诱导的HUVECs中炎症因子如IL-6、TNF-α、COX-2和INOS的表达。除此之外，ABP还可以抑制HUVECs中LPS诱导的细胞粘附分子如ICAM-1、VCAM-1的表达。而这种保护作用可能是由于ABP在一定程度上抑制了HUVECs中NF-κB信号通路相关蛋白的激活来实现的。<br>　　实验结论：<br>　　ABP可以通过抑制LPS诱导的炎症因子和细胞粘附分子的合成来减轻HUVECs的损伤，而其分子机制可能是通过抑制细胞中NF-κB信号通路的激活来实现。