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摘要目的：<br>　　1、构建小鼠盲肠结扎穿孔脓毒症模型（CecalLigation Puncture Procedure；CLP），研究STAT3抑制剂BP-1-102对小鼠脓毒症所引起的肾功能损伤、肾组织炎症的影响。<br>　　2、探索STAT3抑制剂BP-1-102对脓毒症小鼠急性肾损伤中细胞凋亡的影响，观察凋亡相关指标的变化。<br>　　3、探索STAT3抑制剂BP-1-102影响脓毒症小鼠急性肾损伤的机制以及可能参与的细胞信号通路。<br>　　方法：<br>　　1、将8周C57BL/6雄性小鼠，控制体重在20-25g之间，进行称重标记后随机分为六组：假手术6小时组（Sham6h组）、脓毒症6小时组（CLP6h组）、BP-1-102治疗6小时组（CLP+BP-1-1026h组）以及假手术24小时组（Sham24h组）、脓毒症24小时组（CLP24h组）、BP-1-102治疗24小时组组（CLP+BP-1-10224h组）。脓毒症6小时组和脓毒症24小时组行盲肠结扎穿孔术，假手术6小时和假手术24小时组行开关腹处理。BP-1-102治疗6小时组和BP-1-102治疗24小时均在CLP手术前2小时予腹腔注射BP-1-102处理。分别于6小时或24小时后麻醉，然后摘除眼球处死各对应组小鼠，留取小鼠血清和肾组织样本，以用于后续实验。<br>　　2、检测小鼠血清肌酐、尿素氮浓度以评估小鼠肾功能变化；取小鼠肾组织制作石蜡切片行HE染色和PAS染色，光镜下观察肾组织病理改变；取小鼠肾组织提取mRNA，行RT-PCR检测相关炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的基因表达量变化；提取肾组织总蛋白，进行Western Blotting检测，检测嗜中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）、STAT3、p-STAT3、ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达量。<br>　　3、取小鼠肾组织进行冰冻包埋，进行冰冻切片后予TUNEL染色处理，检测细胞核内DNA断裂情况，以了解肾组织细胞凋亡情况；提取小鼠肾组织总蛋白，进行Western Blotting检测，检测细胞凋亡相关蛋白BAX、BCL-2的表达量变化；利用小鼠肾组织总蛋白检测Caspase3酶活性，以评估不同组肾组织细胞凋亡的情况。<br>　　结果：<br>　　1、CLP组肾损伤程度明显大于Sham组，而BP-1-102有效减少肾功能损伤：与Sham组相比较，6小时和24小时CLP小鼠血清肌酐、尿素氮的浓度均明显升高。在BP-1-102作用后，不论是6小时组还是24小时组，血清肌酐和尿素氮均有下降。WB结果显示，CLP组小鼠NGAL表达量明显高于对照组小鼠，而BP-1-102有效减少脓毒症导致的NGAL分泌，提示BP-1-102有效缓解脓毒症导致急性肾损伤所引起的肾功能损害。<br>　　2、小鼠HE染色和PAS染色结果显示：与Sham组相比较，不论是6小时组还是24小时组均可见大面积肾小管上皮细胞空泡样变、细胞肿胀，以及部分肾小管上皮细胞坏死、脱落和基底膜脱落，并可在管腔内看见脱落细胞。脓毒症组还可见近端小管的刷状缘变薄或缺失。而在BP-1-102治疗组，出现病变的面积明显少于CLP组。提示BP-1-102缓解脓毒症导致的急性肾损伤。<br>　　3、RT-PCR结果：与Sham组相比较，不论是6小时还是24小时的组别，CLP小鼠的炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表达水平明显提升。相对应的，BP-1-102治疗组中，每一个对应指标的表达量均明显下降，具有统计学差异。提示BP-1-102减少脓毒症致肾脏炎症反应。<br>　　4、凋亡检测结果：与Sham组相比，不论是6小时还是24小时的CLP小鼠BAX/BCL-2比值明显升高，Caspase3酶活性明显增强，提示脓毒症小鼠肾脏细胞凋亡发生增加。而BP-1-102在6小时和24小时均有抑制细胞凋亡发生的作用。<br>　　5、TUNEL荧光检测结果：Sham组均未见细胞核内荧光，6小时和24小时CLP组出现较多细胞凋亡荧光标记。相比之下，BP-1-102治疗组的荧光数量较CLP组有所减少。<br>　　6、相关通道蛋白检测：6小时和24小时CLP组p-STAT3、p-ERK1/2的表达量激活程度明显大于对照组。在BP-1-102的抑制作用下，治疗组的p-STAT3、p-ERK1/2的表达量明显下降。说明BP-1-102有效抑制了STAT3的激活，并且抑制了MAPK通路的激活。<br>　　结论：<br>　　1、BP-1-102能够缓解脓毒症小鼠急性肾损伤，可能通过抑制JAK/STAT通路和MAPK/ERK通路减轻脓毒症引起的肾脏炎症反应。<br>　　2、BP-1-102抑制脓毒症小鼠肾脏细胞凋亡，有利于限制肾脏损伤，从而减少脓毒症引起的病理损害。