摘要目的:<br> 通过对TCA切片采用不同染色分析比较染色技术对TCA推断年龄的影响。其次,在TCA计数过程中使用mimics软件处理图像生成波谱图,间接直观的反映TCA的数量,对比肉眼观察和计算机计数推断年龄的差异性,进而探究TCA与年龄的一致性。<br> 方法:<br> 根据联合国世界卫生组织(WHO)提出的年龄分段,选择18-44岁青年的完整牙齿为样本材料。用蒸馆水冲洗后,不脱钙树脂渗透包埋,使用德国EXAKT300CP硬组织切片机和德国EXAKT400S磨片机制作磨片每个样本的三张磨片分别中对其中任意两张进行传统的苏木精和伊红(HE)染色法和Goldner's染色法处理,将所得样本置于普通光学显微镜下观察,保存图像,利用人工观察法和计算机辅助方法即将图像导入mimics软件中,划分出牙骨质生长规律明显的区域,根据不同组织的灰度值差异,生成更为直观的能反映出牙骨质环的数目的图像,间接计算出TCA的数目,最后,将两种方法所得结果采用SPSS21.0统计分析软件进行统计学分析,P<O.05为变量间差异具有统计学意义或存在线性关系,GraphPadPrism7.0绘图软件进行图像绘制。不同染色方法对TCA的影响结果和肉眼观察计算机辅助下计数TCA的计量结果因不符合正态分布,故两组间应用Spearman相关分析和散点图做相关性分析,对于不同方法估计年龄的重复性与一致性检验,用组内相关系数及Bland-Altman分析法。<br> 结果:<br> HE染色和不染色切片在肉眼和计算机辅助所得的TCA都具有较强的相关性(r>0.8)而goldner's染色只在计算机辅助下与其余两种方法具有相关性。同种染色切片肉眼和计算机辅助计数的相关性分析显示在田染色下两种结果间的相关性(r>0.8)高于其余两种方法。ICC一致性检验结果可得计算机辅助下三种染色方法推断的年龄和实际年龄一致性较强(ICC>0.75)而当肉眼观察时Goldner's染色结果与实际年龄间存在较弱的一致性(ICC>O.4),另外两种方法一致性较强(ICC>0.75)。利用95%CI验证TCA与实际年龄的关系,结果显示HE染色切片在计算机辅助观察下95%CI范围最小,得出的TCA准确性越高。<br> 结论:<br> HE染色较磨片观察所得TCA的准确度高,而Goldner's、染色反而增加了对TCA的观察计数难度最不利于分析。利用计算机辅助计数TCA能更为直观的反映出牙骨质环明暗相间的结构,操作过程较简单,准确度较肉眼直接观察时高。验证TCA在不同方法下TCA与实际年龄的关系是否符合公式,即TCA+牙齿萌出的平均年龄=实际年龄,最终结果显示HE染色切片在计算机辅助观察下的结果在95%置信区间范围最小,说明该方法得到的TCA推断年龄与实际年龄更接近。
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