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摘要背景：<br>　　类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis, RA)是一种典型的自身免疫性疾病，主要病理特征为持续滑膜炎，最终导致关节软骨及骨破坏。业已证明，T/B淋巴细胞失衡及过度活化、产生大量自身抗体为RA疾病发生发展的重要阶段。最新研究发现的两类新型CD4+T细胞：滤泡辅助性T细胞(Follicular helper T cells, Tfh)和滤泡调节性T细胞(Follicular regulatory T cells, Tfr)在自身免疫病淋巴细胞滤泡生发中心(Germinal centers, GCs)的形成、调控B细胞增殖分化产生抗体，从而维持免疫稳态中发挥重要的作用，同时也是当前免疫学前沿热点。Tfh促进B细胞分化成为浆细胞产生高亲和力的抗体，Tfr为负性调控细胞，对Tfh起抑制作用。两者的失衡可能是RA中类风湿因子(RF)、抗环状瓜氨酸肽抗体(Anti-CCP)等异常自身抗体产生的重要机制。目前国内外对于RA患者外周血中Tfr和Tfh的研究尚处于探索起步阶段，尤其是关于其亚群的表达和功能尚未完全明确。本研究拟探讨RA患者外周血中Tfr、Tfh细胞及其亚群的表达水平及功能，旨在揭示RA中抗体的产生机制，为其提供新的治疗方向和靶点。<br>　　目的：<br>　　研究RA患者与健康对照组外周血中Tfr、Tfh及其亚群的表达水平，探索与疾病活动指标、异常自身抗体的相关性；观察外周血Tfr、Tfh功能转录分子Bcl-6、Blimp-1mRNA及相关细胞因子IL-21mRNA的表达。<br>　　方法：<br>　　1.按照纳入标准选取47例RA患者，同时取18例健康人作为健康对照组(简称HC组)，47例RA患者包括17例RA初发组及30例RA治疗组患者。通过DAS28评估其疾病活动度，并收集入院ESR、CRP、RF、抗CCP抗体等指标数据。同时留取外周血，采用流式细胞术检测Tfr、Tfh细胞及其亚群细胞占CD4+T细胞的比值；Tfr为FOXP3+Treg(CD4+CD25+FOXP3+)细胞的亚群，CD45RA为区分原始和记忆T细胞的标志，即CD45RA-表示记忆性细胞，故在我们的研究中用①CD3+CD4+CD25+CXCXR5+FOXP3+标记表示总Tfr细胞，CD3+CD4+CD25+CXCR5+CD45RA-FOXP3+标记表示记忆Tfr细胞(即是活化Tfr)。②目前认为外周血中Tfh典型表型为CD4+CXCR5+，我们的研究中标记CD3+CD4+CXCR5+CD45RA-表示外周血总Tfh细胞。并对外周血总Tfh细胞进行了PD-1的标记，PD-1+Tfh代表Tfh中功能较强的效应记忆Tfh(Tfh-EM)细胞；另外根据趋化因子CXCR3及CCR6的标记分为Tfh1细胞(CXCR3+CCR6-)，Tfh2细胞(CXCR3-CCR6-)，Tfh17细胞(CXCR3-CCR6+)及CXCR3+CCR6+亚群细胞进行Tfh亚群细胞的研究。<br>　　2.对其中10例初发RA患者及7例健康对照，分离外周血单核细胞，RT-PCR检测IL-21、Bcl-6、Blimp-1mRNA的表达。<br>　　结果：<br>　　1.RA组与健康对照组相比，总Tfr细胞、记忆Tfr细胞百分比均明显降低(P＜0.05)，总Tfh、PD-1+Tfh(Tfh-EM)、Tfh17及CXCR3+CCR6+亚群细胞百分比明显升高(P＜0.05)；关于两者比值比较，RA组Tfr/Tfh比值明显低于健康对照组(P＜0.05)。<br>　　2.与健康对照组相比，RA初发组记忆Tfr细胞百分比减少(P＜0.05)，Tfh、PD-1+Tfh(Tfh-EM)、Tfh17、CXCR3+CCR6+亚群细胞百分比均增加(P＜0.05)，Tfr/Tfh比值减少(P＜0.05)。与健康对照组相比，RA治疗组Tfr、记忆Tfr细胞百分比减少(P＜0.05)，PD-1+Tfh(Tfh-EM)、Tfh17细胞百分比增加(P＜0.05)，Tfr/Tfh比值减少(P＜0.05)。RA初发组和RA治疗组相比，初发组Tfr、Tfh、PD-1+Tfh(Tfh-EM)、Tfh1、CXCR3+CCR6+亚群细胞百分比均增加(P＜0.05)。<br>　　3.Tfh(r=0.326,P=0.025)及其亚群Tfh1(r=0.346,P=0.017)、CXCR3+CCR6+(r=0.363,P=0.012)细胞百分比与抗核抗体(ANA)存在正相关。<br>　　4.初发RA患者外周血中Blimp-1mRNA表达水平较健康人明显减低(P＜0.05)，IL-21及Bcl-6mRNA表达无明显差异。<br>　　结论：<br>　　1.RA中存在Tfr表达降低，Tfh表达升高导致Tfr/Tfh比值失衡的现象。2.减少的记忆Tfr及增加的PD-1+Tfh(Tfh-EM)细胞参与RA的发病，Tfh不同亚型在RA不同疾病阶段中表达存在差异，Tfh17及目前在RA中尚未报道的CXCR3+CCR6+亚群细胞发挥致病作用。3.Blimp-1调控Tfh、Tfr的表达，对Tfr分化可能发挥正向调控的作用，而对Tfh的分化可能发挥负向调控的作用。