检索历史 清除

摘要目的和内容：<br>　　糖尿病是胰岛细胞功能障碍及胰岛素抵抗引起的糖脂代谢疾病，超过90％的糖尿病为2型糖尿病(T2DM)。糖尿病流行的原因有很多，包括人口老龄化、经济发展、城市化、不健康的饮食习惯和久坐的生活方式。非酒精性脂肪肝(NAFLD)与肥胖、胰岛素抵抗、T2DM等代谢紊乱紧密相关。AMPK在调节能量平衡中起重要作用，然而，AMPK亚基α2在NAFLD中的作用不明。本研究探讨AMPKα2在NAFLD发生发展中的作用及机制。此外，肠道微生物群与肥胖有密切关系，本研究第二部分探讨相关肥胖的肠道微生物菌种产丁酸梭菌对代谢紊乱的影响及其发酵产物短链脂肪酸(SCFAs)在该过程中的作用。<br>　　方法和结果：<br>　　第一部分分别给予AMPKα2敲除和同周龄C57BL/6野生型雄性小鼠正常饮食和含60%脂质的高脂饮食12周，构建NAFLD模型。禁食6小时后取肝脏和血浆，油红O染色检测肝脏脂质沉积，实时定量PCR检测炎症相关基因的表达，免疫荧光及免疫组化检测肝脏炎症浸润，Westernblot检测相关蛋白表达。结果显示，与野生型小鼠相比，高脂饮食后AMPKα2敲除小鼠肝脏脂肪酸氧化速率降低，甘油二酯、甘油三酯含量、脂质沉积、肝脏炎症和CD68显著增多，NF-κB上游分子IKKα/β磷酸化显著增加，NF-κB转位入核显著增多。尾静脉注射激活型AMPKα2腺病毒或给予NF-κB信号通路抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)可保护肝脏免受脂质负荷引起的炎症，缓解肝脏脂质异位沉积甚至纤维化的发生，且肝脏中NF-κB磷酸化及转位入核显著降低，肝脏炎症缓解。<br>　　第二部分构建胰岛素抵抗动物模型，雄性C57BL/6小鼠喂食对照饲料或高脂饲料20周后，灌胃给予产丁酸梭菌悬液或氯化钠对照悬液8周，取材。免疫组织化学、流式细胞术和实时定量PCR评估全身性炎症，16SrRNA基因测序检测细菌群落的丰富度变化，Westernblot检测胰岛素靶组织中GPR41/43、胰岛素信号通路和炎症信号通路的变化。同时构建细胞模型，检测SCFAs对GPR41/43、炎症信号通路及胰岛素信号通路的影响。结果显示，灌胃产丁酸梭菌后，胰岛素靶组织中GPR41/43信号显著激活，高脂饮食引起的系统性炎症、糖代谢紊乱、胰岛素抵抗、肝脏脂质异位沉积和肠道菌群失调均得到显著缓解。产丁酸梭菌显著改善高脂饮食喂养小鼠的肠道微生物群丰富度，同时伴随肠道结构、屏障功能的改善及肠道炎症缓解。<br>　　结论：<br>　　在基因水平干预AMPKα2或通过灌胃丁酸梭菌影响肠道菌群的组成均可减轻高脂饮食引起的糖脂代谢紊乱、胰岛素抵抗和系统性炎症。激活胰岛素靶组织的GPR43或抑制NF-κB信号通路可作为治疗肥胖引起的代谢综合征的重要靶点。