检索历史 清除

摘要子宫内膜癌(endometrial cancer)是女性生殖系统中常见的三大恶性肿瘤之一，它的发生发展是一个涉及多因素、多阶段的复杂生物过程，其中80%为无孕激素拮抗的雌激素刺激内膜导致的I型EC，既往的研究发现肥胖、高血压、2型糖尿病和多囊卵巢综合征等代谢综合征(Metabolic syndrome,MS)均为子宫内膜癌发病的危险因素，然而，要充分了解肿瘤的生物学行为，还必须了解癌细胞所处的微环境，包括免疫细胞(T淋巴细胞、B细胞、NK细胞等)、细胞因子、成纤维细胞等复杂成分构成，其中CD4+T淋巴细胞介导的细胞免疫，在肿瘤免疫中具有重要作用。随着对肿瘤免疫微环境的深入研究，发现肿瘤微环境与多种恶性肿瘤的发生、转移有着密切的联系。目前，CD4+T细胞及其细胞亚群与子宫内膜癌的研究尚处于起步阶段，CD4+T细胞亚群之间通过细胞因子维持着动态的免疫平衡，一旦平衡被打破便会导致炎症、自身免疫性疾病和肿瘤的发生。然而，EC患者中CD4+T细胞亚群之间是否具有相互作用的关系，以及CD4+T细胞亚群是否能促进EC进展的机制仍未可知，因此，基于以上问题为出发点，本研究将分四部分初步探讨子宫内膜癌患者外周血和组织中CD4+T细胞亚群的表达及各亚群之间的相关性。<br>　　方法：<br>　　①收集351例子宫内膜癌患者的外周血的常规指标和临床病理特征，分析免疫炎性细胞指标与患者临床病理特征、预后的关系，并重点探讨F-NLR评分和F-PLR评分是否能作为预测EC患者预后的指标。<br>　　②采用质谱流式方法、qRT-PCR方法从T细胞表面标记物层面和转录因子水平层面探究正常内膜对照组(NC组)、不典增生组(AH组)和子宫内膜癌组(EC组)三组外周血中CD4+T细胞亚群比例变化，并初步探究外周血CD4+T细胞各亚群比例之间的相关性。<br>　　③采用质谱流式方法、qRT-PCR方法从T细胞表面标记物层面和转录因子水平层面探究正常内膜对照组(NC组)、不典增生组(AH组)和子宫内膜癌组(EC组)三组组织中CD4+T细胞亚群比例变化，并初步探究外周血CD4+T细胞各亚群比例之间的相关性。<br>　　④体外提取CD4+T细胞，与子宫内膜癌细胞株体外构建Transwell共培养模型，观察CD4+T细胞对子宫内膜癌细胞的迁移、侵袭能力的影响。<br>　　结果：<br>　　①高F-NLR得分与病理类型为II型、G3分级、Ⅲ+Ⅳ期的子宫内膜癌患者关系更密切；高F-PLR得分与年龄≥60岁、绝经后状态、病理类型为Ⅱ型、Ⅲ+Ⅳ期和宫颈间质受累的EC患者关系更密切；对影响EC患者总体生存期和无瘤生存期的多因素分析提示：Ⅱ型EC、FIGO分期为Ⅲ+Ⅳ期、高F-NLR得分、高F-PLR得分是EC患者预后的独立危险因素。<br>　　②EC组外周血中Th1细胞及T-betmRNA表达水平较NC组明显降低，而Th2细胞及GATA3mRNA表达水平明显升高；EC组外周血中Th17细胞及RORγtmRNA表达水平较NC组明显升高，Treg细胞及FOXP3mRNA表达水平也明显升高；EC患者外周血中Th22细胞及AHRmRNA表达水平较NC组、AH组明显升高；各亚群之间相关性分析显示在EC组和AH组患者中Th1细胞表现出与Th2细胞具有正相关性，而在NC组中Th17细胞和Treg细胞之间呈现出正相关性。<br>　　③EC组和AH组中局部组织浸润Th1细胞及T-betmRNA表达水平要低于NC组；EC组中Th2细胞比例明显高于NC组，而GATA3mRNA表达水平在AH组和EC组中逐渐递增；EC组中Th17细胞比例及RORγtmRNA表达水平、Treg细胞比例及FOXP3mRNA表达水平和Th22细胞及AHRmRNA表达水平均要高于NC组；相关性结果显示EC组中Th1细胞与Th2细胞之间呈正相关性。<br>　　④Transwell共培养实验表明体外CD4+T细胞对子宫内膜癌Ishikawa细胞和KLE细胞的侵袭能力有一定程度的影响。<br>　　结论：<br>　　1.子宫内膜癌初始治疗前外周血F-NLR和F-PLR评分更高的患者可能是总体生存期(OS)和无瘤生存期(PFS)潜在不良预后的独立危险因素，结合免疫炎性指标F-NLR和F-PLR的新型分级系统可作为EC的预后指标。<br>　　2.EC患者外周血和组织中Th1细胞及主要转录因子T-betmRNA表达水平较NC组要明显降低，Th2细胞及GATA3mRNA转录因子表达水平、Th17细胞及RORγtmRNA转录因子表达水平、Treg细胞及FOXP3mRNA转录因子表达水平、Th22细胞及AHRmRNA转录因子表达水平较NC组要明显升高，提示循环外周血和局部肿瘤微环境中Th1/Th2比例的失衡、Th17/Treg比例的失衡以及Th22细胞比例的异常可能都参与了EC患者疾病进展的过程。<br>　　3.Transwell共培养模型发现，体外CD4+T细胞对子宫内膜癌Ishikawa细胞和KLE细胞的侵袭能力有一定程度的影响。