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摘要目的：本研究拟对增生性糖尿病视网膜病变(Proliferative diabetic retinopathy, PDR)患者玻璃体中脱落的微粒(Microparticles, MPs)进行形态观察和大小鉴定；分别检测PDR患者玻璃体液标本中脱落的内皮细胞(Endothelial cell-derived microparticles, EMPs)、血小板(Platelet-derived microparticles, PMPs)、视网膜光感受器细胞来源的MPs(Retinal photoreceptor cell-derived microparticles, RMPs)水平和表达磷脂酰丝氨酸的微粒(Phosphatidylserine-expressing microparticles, PS-MPs)水平；分析不同来源MPs水平与PDR临床特点的关系，从而探讨不同来源MPs参与PDR致病的机制，为临床干预措施的研究提供理论依据。<br>　　方法：纳入2018年1月至2018年12月在天津医科大学总医院眼科住院并接受玻璃体切除手术治疗的74例患者(74只眼)，实验组为PDR患者54例(54只眼)，其中术前联合抗血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor, VEGF)药物玻璃体腔注射的为17例(17只眼)；对照组为20例患者(20只眼)，包括特发性黄斑裂孔6例(6只眼)、特发性黄斑前膜6例(6只眼)、玻璃体黄斑牵拉综合征2例(2只眼)、晶状体完全脱位6例(6只眼)。通过密度梯度离心法和超速离心法制备玻璃体微粒样品，在透射电子显微镜下观察离心后的玻璃体液标本中的MP，行形态学鉴定；通过纳米颗粒追踪技术分析玻璃体液标本中的MP大小及粒径分布范围；利用流式细胞术检测患者玻璃体液标本中的MPs水平，包括EMPs、PMPs、RMPs和PS-MPs的水平，比较实验组与对照组间的差异。对PDR组的MPs水平与PDR患者糖尿病病程、血糖水平、视力等临床因素进行相关性分析，并进一步比较PDR不同分期之间、PDR组中术前眼内注药与不注药之间、PDR组中术前眼内注药与对照组之间、PDR组中伴与不伴玻璃体积血之间的4种MPs水平。<br>　　结果：在透射电镜下观察到玻璃体液标本中脱落的MPs形态各异，大多呈现典型的圆形或椭圆形囊泡状，具有完整的双层膜结构，其长径约100-1000nm。通过纳米颗粒追踪分析玻璃体液标本中脱落的MPs，发现其粒径分布主要集中在119nm、229nm、327nm、536nm、691nm区域范围。通过流式细胞术成功建立了人类玻璃体液标本中脱落的MPs的检测模版；PDR组患者玻璃体液标本中脱落的EMPs(3915.69±4841.12)高于对照组(525.7±532.36)(P＜0.001)，PMPs(3881.61±5970.95)高于对照组(750.0±1590.88)(P=0.001)，RMPs(4797.84±5106.12)低于对照组(7429.30±6965.74)(P=0.018)。对PDR组MPs水平的相关性分析结果显示，PS-MPs水平与PDR患者糖尿病病程(r=0.271,P=0.048)和术前视力(r=0.338,P=0.017)显著相关。进一步比较发现，随着PDR病程发展，4种MPs水平均有升高趋势，其中，PMPs由2563.51±4332.54升至5952.91±7554.69(P=0.041)，RMPs由3610.16±3804.07升至6664.21±6320.88(P=0.031)，EMPs由3850.80±5097.23升至4017.65±4529.67(P=0.903)，PS-MPs由1324.80±2906.79升至2813.23±5285.65(P=0.188)。此外，比较有无术前联合抗VEGF药物玻璃体腔注射史的2个亚组，发现有术前联合注药的PDR患者玻璃体液标本中脱落的EMPs水平(1902.69±2266.01)显著低于未注药组(4840.57±5424.83)(P=0.007)，但仍高于正常对照组(525.74±532.36)(P=0.025)。比较PDR伴和不伴玻璃体积血的2个亚组，发现不伴玻璃体积血的PDR患者玻璃体液标本中脱落的PMPs(8249.20±8748.14)高于PDR伴玻璃体积血的亚组(2633.73±4286.75)(P=0.030)。<br>　　结论：(1)PDR患者的玻璃体液标本中存在脱落的内皮细胞、血小板、感光细胞来源的微粒和表达PS的微粒，是具有完整双层膜结构的囊泡。(2)PDR患者玻璃体液中脱落的EMPs、PMPs均高于对照组，可能与视网膜微血管受损有关。(3)PDR患者玻璃体液中脱落的PS-MPs水平与患者糖尿病病程、术前视力(LogMAR)呈正相关关系，提示MPs水平可以反映病变程度。(4)所有4种MPs水平均随PDR病变加重有升高趋势，其中PMPs和RMPs升高最显著，提示随着微血管和视网膜组织的损害加重，更多的细胞受到刺激而释放出大量MPs。(5)PDR患者术前联合应用抗VEGF眼内注药可能通过降低EMPs水平而发挥一定的治疗效果，但不能在短时间内完全修复受损的视网膜血管和组织。(6)PDR患者玻璃体积血可能与PMPs的作用有关。