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摘要研究目的<br>　　观察活血清解灵对α-异硫氰酸萘酯(ANIT)诱导的胆汁淤积性肝损伤大鼠模型的治疗作用：通过G蛋白偶联胆汁酸受体(TGR5)-核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)-半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)信号通路探讨TGR5在胆汁淤积性肝损伤中的作用；探讨胆汁淤积性肝损伤大鼠体内胆汁酸代谢机制以及活血清解灵对胆汁酸代谢的影响。<br>　　研究方法<br>　　将Wistar大鼠随机分成6组，分别为对照组，模型组，复方甘草酸苷组，活血清解灵低、中、高剂量(4.1 g·kg-1、8.1 g·kg-1、16.2 g·kg-1)组。以ANIT(100 mg·kg-1)灌胃一次制备胆汁淤积性肝损伤模型，复方甘草酸苷及活血清解灵在模型制备后开始灌胃给药，连续4天。第5天大鼠在麻醉状态下行胆管插管，随后留取胆汁、血清和肝组织。通过测量胆汁的体积与留取时间，计算胆汁流速；采用全自动生化分析仪检测血清中总胆红素(TBIL)、总胆汁酸(TBA)、直接胆红素(DBIL)、间接胆红素(IBIL)、谷丙转氨酶(ALT)含量；通过苏木素-伊红(HE)染色方法观察肝组织病理变化；通过免疫组化实验对α-SMA的表达进行定位分析；通过蛋白质免疫印迹实验检测肝组织中TGR5、NLRP3、Caspase-1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和钠-牛磺胆酸盐共转运多肽(NTCP)的表达；通过高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS/MS)检测胆汁中18种胆汁酸含量。<br>　　研究结果<br>　　(1)与对照组比较，模型组胆汁流速显著减慢(P＜0.01)；与模型组比较，活血清解灵高剂量组大鼠胆汁流速显著加快(P＜0.05)。<br>　　(2)与对照组比较，模型组大鼠血清中TBIL、DBIL、IBIL、ALT、TBA含量均显著增高(P＜0.01)；与模型组比较，复方甘草酸苷组和活血清解灵各组中TBIL、DBIL、IBIL、ALT、TBA含量均有一定程度的降低，其中活血清解灵高剂量组各项血清学指标降低较为显著(P＜0.05)。<br>　　(3)对照组大鼠的肝组织结构较为完整，细胞形态正常；模型组汇管区中胆管增生扩张，大量炎细胞浸润，胆管和胆管上皮细胞均出现一定形态改变；复方甘草酸苷组和活血清解灵各组上述病变均有不同程度的改善，其中活血清解灵中、高剂量组改善明显。<br>　　(4)与对照组比较，模型组中α-SMA以汇管区为中心表达显著增强(P＜0.01)；与模型组比较，活血清解灵高剂量组α-SMA表达显著减弱(P＜0.01)。<br>　　(5)与对照组比较，模型组NLRP3表达含量显著降低(P＜0.01)，TGR5、Caspase-1表达含量均显著增高(P＜0.01)；与模型组比较，活血清解灵中、高剂量组NLRP3表达显著增高(P＜0.05)，活血清解灵高剂量组TGR5表达显著降低(P＜0.05)；复方甘草酸苷组和活血清解灵高剂量组中Caspase-1表达含量均显著降低(P＜0.05)。<br>　　(6)与对照组比较，模型组NTCP表达降低(P＜0.01)；与模型组比较，活血清解灵高剂量组NTCP表达显著增高(P＜0.05)<br>　　(7)在胆汁中共检测出16种胆汁酸。与对照组比较，模型组各胆汁酸含量均有不同程度下降(P＜0.05)，仅牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)含量显著增高(P＜0.05)；与模型组比较，活血清解灵高剂量组各胆汁酸含量均有提高，其中去氧胆酸(DCA)，牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)，甘氨熊去氧胆酸(GUDCA)，牛磺猪去氧胆酸(THDCA)，甘氨胆酸(GCA)的含量显著增高(P＜0.05)，TCDCA含量显著降低(P＜0.05)。<br>　　研究结论<br>　　(1)活血清解灵可通过抑制肝脏炎症反应，减轻肝细胞损伤，抗纤维化，促进胆汁分泌，影响胆汁酸谱组成，积极调节肝内胆汁酸代谢等方面有效治疗胆汁淤积性肝损伤，为该中药复方的利胆作用提供了实验依据。<br>　　(2)在ANIT诱导的胆汁淤积性肝损伤模型中，肝组织中TGR5的高表达显著抑制了NLRP3的表达，进一步证明了其二者之间的关联。<br>　　(3)不同的胆汁酸成分会对胆汁淤积性肝损伤造成不同的影响，胆汁酸TCDCA含量的增高可能是造成肝损伤的原因之一。