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摘要目的：明确miR-20b-5p对鼻咽癌细胞增殖、凋亡的影响，并探讨miR-20b-5p靶向AEN调控鼻咽癌细胞增殖及凋亡的作用机制。<br>　　方法：采用qRT-PCR检测miR-20b-5p在鼻咽癌患者血清，鼻咽癌细胞株CNE1、HNE2、HONE1以及永生化的正常鼻咽上皮细胞NP69中的表达情况；以鼻咽癌细胞CNE1、HONE1为研究对象，分别转染NC对照、miR-20b-5pmimics和miR-20b-5pinhibitor上调或下调miR-20b-5p的表达，并采用qRT-PCR检测进行验证细胞。平板克隆形成实验、CCK8法、裸鼠成瘤实验从体内外分别分析miR-20b-5p表达改变对细胞集落形成、细胞增殖、裸鼠成瘤的影响；流式细胞术检测miR-20b-5pmimics和miR-20b-5pinhibitor转染48h后细胞凋亡情况；采用生物信息学分析预测miR-20b-5p下游靶基因，并采用荧光素酶报告基因检测进行验证；Westernblot法检测miR-20b-5p表达改变对细胞AEN、Caspase3、Parp、Bax、Bcl-2、Bcl-xl等凋亡蛋白的表达影响。此外，分析转染miR-20b-5pmimics同时过表达AEN，或者转染miR-20b-5pinhibitor同时与敲低AEN表达，分别采用CCK8法、流式细胞术、Westernblot检测上述鼻咽癌细胞增殖、凋亡情况，以及AEN、Caspase3、Parp、Bax、Bcl-2、Bcl-xl等蛋白的表达改变。<br>　　结果：在鼻咽癌细胞中miR-20b-5p的表达明显高于正常鼻咽上皮细胞(P＜0.001),而且miR-20b-5p在鼻咽癌患者血清中的表达也明显高于健康人(P＜0.0001)，临床意义分析显示，miR-20b-5p高表达与鼻咽癌患者的大肿块和较晚的临床分期明显正相关(P＜0.01)。用miR-20b-5pmimics转染可明显上调鼻咽癌细胞miR-20b-5p的表达，而转染miR-20b-5pinhibitor可明显下调miR-20b-5p的表达(P＜0.001)。转染miR-20b-5pinhibitor下调miR-20b-5p后，细胞的克隆形成能力明显减弱，细胞增殖明显受到抑制，细胞凋亡明显，裸鼠皮下种植瘤生长缓慢；而当转染miR-20b-5pmimics上调miR-20b-5p后，细胞的克隆形成能力、细胞增殖能力明显增强，细胞凋亡显著减少，裸鼠皮下种植瘤生长明显增快。生物信息学预测显示AEN是miR-20b-5p下游靶基因，并且荧光素酶报告基因检测显示miR-20b-5p确实可以靶向抑制AEN的转录活性。同时我们研究发现，过表AEN可明显抑制鼻咽癌细胞增殖，诱导鼻咽癌细胞凋亡，而沉默AEN的表达显著促进鼻咽癌细胞增殖，抑制其凋亡；当转染miR-20b-5pmimics同时过表达AEN，可明显削弱miR-20b-5p对鼻咽癌细细胞增殖以及抗凋亡作用的促进，而转染miR-20b-5pinhibitor同时与敲低AEN表达，可明显抵抗miR-20b-5p敲低对鼻咽癌细胞增殖和抗凋亡的抑制作用。进一步研究发现，miR-20b-5pinhibitor可明显上调AEN、Caspase3、Parp、Bax等蛋白的表达，下调Bcl-2、Bcl-xl蛋白的表达P＜0.05)；miR-20b-5pmimics则明显下调AEN、Caspase3、Parp、Bax等蛋白的表达，上调Bcl-2、Bcl-xl蛋白的表达P＜0.05)。<br>　　结论：1.miR-20b-5p在鼻咽癌中高表达，并与鼻咽癌患者的临床分期正相关，可能是鼻咽癌潜在的生物标志物；2.miR-20b-5p促进鼻咽癌细胞增殖，其机制与靶向下调AEN表达抑制鼻咽癌细胞凋亡相关。