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摘要Sirtuin蛋白家族是一系列NAD+依赖的组蛋白去乙酰化酶，在细胞内广泛分布并表达。大量研究表明，这些蛋白参与基因转录、细胞周期、分化、凋亡、应激、代谢及基因组稳定调控等许多重要的生物学反应，具有调节生命体新陈代谢和延长寿命的重要作用。SIRT2是其中重要的一员，能够去乙酰化组蛋白H4K16、微管蛋白等靶蛋白。有证据显示，H2O2诱导的氧化应激可以提高SIRT2的表达，同时SIRT2还通过去乙酰化FOXO3a降低细胞内活性氧水平，因此SIRT2可以在热量限制和氧化应激等条件下，保护机体免受活性氧的损伤。<br>　　细胞在生存过程中时常因内源或外源刺激而产生DNA损伤，损伤如果得不到及时有效的修复，将会导致基因组的不稳定，进而诱发各种疾病。其中由活性氧造成的单链损伤大多由碱基切除修复(BER)这条通路来完成，这对于维持基因组的稳定有着极其重要的作用。此前已有相关研究表明Sirtuin家族在DNA修复中起到作用，但如何参与调控BER通路还缺乏更为直接的证据。由于SIRT2和BER都参与到细胞对于活性氧抵抗的过程中，因此本课题旨在探索SIRT2调控BER的具体分子机制。<br>　　主要研究结果如下：<br>　　(1)SIRT2参与DNA损伤修复，且作用于碱基切除修复BER。我们利用实验室先前构建的BER效率检测系统，发现在细胞中过表达SIRT2促进细胞BER的效率，敲降SIRT2能够抑制BER效率。同时通过细胞生长曲线、克隆形成实验、彗星电泳实验发现，SIRT2缺失会提高基因组的不稳定，降低细胞的生长能力。<br>　　(2)SIRT2作用于BER通路的关键蛋白OGG1。作为去乙酰化酶，SIRT2具有去乙酰化靶蛋白并调控其生理功能的作用。我们通过免疫共沉淀实验发现SIRT2可以与BER通路重要的糖基化酶OGG1相互作用，并且能够去乙酰化OGG1。证明SIRT2的确能够作用BER通路中的因子从而发挥调控作用。<br>　　(3)SIRT2能够促进OGG1启动子活性。我们发现SIRT2去乙酰化OGG1能够上调OGG1的蛋白表达水平，敲降SIRT2显著抑制了OGG1的表达。通过检测OGG1mRNA水平发现也有相应的调控趋势。利用染色质免疫共沉淀实验我们发现OGG1能够结合到自身启动子区域从而提高启动子活性，过表达SIRT2有助于促进这一作用。<br>　　结论：SIRT2对于维持细胞的基因组稳定具有重要作用。其通过去乙酰化BER通路中的关键蛋白OGG1，从而促进OGG1招募到自身启动子区域，上调蛋白表达水平，因此提高BER效率。本研究将Sirtuin家族蛋白与DNA损伤修复联系起来，发掘更多分子机制上的证据，旨在为BER通路失调导致的相关疾病和衰老提供临床靶向治疗的办法。