摘要念珠菌能够引起诸多感染性疾病,白念珠菌和近平滑念珠菌是主要致病性念珠菌。生物膜是一种不可逆粘附于生物或非生物组织表面由细胞外基质包裹菌细胞为结构特征的微生物群体。其广泛存在于自然界中,以对抗微生物药物产生耐药为主要特征。生物膜形成后,念珠菌的耐药性大幅增加,使念珠菌感染的治疗愈加困难。两性霉素B作为一种常见的多烯类抗真菌药物,是治疗侵袭性念珠菌病的主要手段,但是其肾毒性严重,降低剂量也不能减轻肾损害,且常为永久性损害,对后续治疗有很大影响,此外,生物膜形成后,抗真菌药物的常规剂量大多是无效的,体外试验表明在这种情况下,抗真菌药的耐药性是非生物膜状态时的1000倍,因此我们迫切需要寻找一种毒副作用小的,可以抑制生物膜生长的替代疗法。研究表明,人参茎叶皂苷具有一定的抗念珠菌活性。为此,我们将两性霉素B与人参茎叶皂苷联合应用于念珠菌生物膜,观察二者是否具有协同作用。本研究表明,二者在对抗念珠菌生物膜方面具有较好的协同作用,可以为临床治疗提供新思路。<br> 目的:<br> 探讨两性霉素B(AMB)联合人参茎叶皂苷(GSLS)对念珠菌生物膜的体外抑制活性。<br> 方法:<br> 采用ITS测序对临床分离的31株经形态学鉴定为念珠菌的菌株进行分子鉴定;按照美国标准化实验室与研究所(CLSI)推荐的M27-A3微量液基稀释法对收集的临床菌株及标准菌株进行体外抗念珠菌生物膜联合药敏实验;使用甲基四氮盐(XTT)减低法和结晶紫分光光度法分别对生物膜的活性和生物膜总量测定。<br> 结果:<br> 31株临床念珠菌中,其中白念珠菌16株、近平滑念珠菌6株、热带念珠菌8株、季也蒙念珠菌1株。XTT减低法结果显示:除白念珠菌标准株ATCC14053外,两性霉素B联合人参茎叶皂苷对其余菌株的FICI值均小于等于0.5(FICI≤0.5)。结晶紫分光光度法显示:将两性霉素B与人参茎叶皂苷联合作用于白念珠菌、近平滑念珠菌、热带念珠菌、季也蒙念珠菌四种菌株时,相较于单独用药,生物膜的生成量均明显减少(P<0.05)。<br> 结论:<br> 两性霉素B与人参茎叶皂苷在体外联用对几种念珠菌生物膜以协同作用为主。相对于单独用药,二者联合不仅能有效地抑制菌株生物膜活力,同时也可以减少生物膜的生成量。
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