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呼吸机相关性肺损伤小鼠内皮微颗粒的变化

摘要背景:<br>  机械通气(MV)是临床上治疗危重症患者的重要手段。MV开始仅作为肺脏通气功能支持治疗手段,目前已发展到涉及气体交换、呼吸作功、肺损伤、胸腔内器官压力及容积环境、循环功能等多方面的重要干预措施,并主要通过提高氧输送(DO2)、保护肺脏、改善内环境等途径,成为治疗多器官功能障碍综合征(MODS)的重要手段。尽管这种辅助手段有挽救生命的巨大作用,但不适当的应用不仅会加重原有肺损伤,还可能诱导新的损伤出现。<br>  内皮细胞微粒(EMPs)是内皮细胞激活或凋亡时从其表面释放的直径小于1μm的微囊泡,具有内皮细胞的某些抗原特性,可有效反映内皮细胞的结构和功能状态内皮细胞微粒(EMPs)是内皮细胞激活或凋亡时从其表面释放的直径小于1μm的微囊泡,具有内皮细胞的某些抗原特性,可有效反映内皮细胞的结构和功能状态。EMPs不仅被认为是内皮功能紊乱的新的标志物,还被认为在炎症、血管损伤、内皮功能障碍和血栓形成中发挥着重要的生物学作用。炎症介质的释放和肺血管内皮细胞损害和功能障碍是肺损伤的主要环节之一,了解EMPs与VILI的关系有助于我们认识和预防VILI。本研究应用大潮气量(VT)MV建立小鼠VILI模型,观察VILI时EMPs的变化,探讨其与VILI的关系和可能作用。<br>  目的:<br>  观察呼吸机相关肺损伤(VILI)小鼠血清内皮微颗粒(EMPs)的变化,并探讨其在VILI中的意义。<br>  方法:<br>  将48只C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为两组:机械通气(MV)组小鼠给予气管插管后进行30mL/kg大潮气量(VT)MV4h,自主呼吸组小鼠气管插管后进行自主呼吸4h,每组24只。两组分别取小鼠心尖血,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清白细胞介素(IL-1β、IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,采用流式细胞仪检测血清EMPs水平;另取小鼠肺组织,测定肺湿/干重(W/D)比值,苏木素-伊红(HE)染色后光镜下观察肺组织形态学改变,醋酸油-柠檬酸铅双染后透射电镜下观察肺组织超微结构改变。<br>  结果:<br>  与自主呼吸组比较,MV组小鼠肺W/D比值明显升高(5.47±0.14比4.34±0.11,t=21.99,P<0.01),血清IL-1β、IL-6、TNF-α及EMPs水平亦明显升高,分别是:[IL-1β(ng/L):42.43±4.35比7.71±3.58,t=21.35,P<0.001;IL-6(ng/L):1239.50±66.32比21.67±4.58,t=47.61,P<0.001;TNF-α(ng/L):237.64±25.78比37.08±19.09,t=21.66,P<0.001;EMPs(个/uL):28.58±1.79比5.87±1.77,t=31.25,P<0.001]。血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平分别和血清EMPs水平呈线性显著正向相关,相关系数分别为(r=0.968、0.932、0.945),(P≤0.001,0.000,0.000)。线性回归方程分别为:Y=2.35X-24.86,Y=34.51X+253.08,Y=13.611X-151.40。<br>  光镜下观察显示:自主呼吸组小鼠肺泡结构完整;而MV组肺泡萎缩或消失,肺实变。部分肺泡融合,肺泡隔增粗。电镜下观察显示:自主呼吸组小鼠肺泡壁完整、无渗出;而MV组肺泡壁水肿、破裂,Ⅱ型肺泡上皮细胞空泡化。<br>  结论:<br>  1、小鼠30ml/kg潮气量通气4h会出现VILI;<br>  2、VILI时血清EMPs水平显著升高;<br>  3、且血清EMPs水平和血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平均存在较强的线性相关关系,提示EMPs和VILI密切相关,EMPs有可能成为呼吸机相关性肺损伤的标志物。

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