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摘要背景与目的：颌面部骨缺损是目前口腔修复面临的重要难题之一。在骨组织再生工程中，微小RNA(microRNA,miRNA)通过不同的靶基因和信号传导通路，影响细胞的分化及组织的发育，其对成骨分化的调控作用已经得到了高度认可。口腔颌面部骨组织对机械力极为敏感，牙槽骨受压力侧发生骨质吸收，受牵拉力则有新骨生成，机械力能够改变颌面部骨组织的发育、形成。我们发现miR-365是一个机械敏感性microRNA,特定的机械刺激能够改变细胞内miR-365的基因表达，并反映出其对机械力的应答。miR-365在软骨细胞成骨分化中具有重要作用，刺激软骨细胞成骨分化，促进骨基质的矿化。然而miR-365对骨髓间充质干细胞(Bone Mesenchymal Stem Cells，BMSCs)成骨分化是否具有调控作用尚不可知，我们将探究，在机械牵张力的作用下miR-365对骨髓间充质干细胞成骨分化的调控作用，探究其可能作用机制。<br>　　实验方法：采取全骨髓贴壁法提取小鼠BMSCs，取小鼠长骨骨髓组织，分离培养小鼠BMSCs，取P3~P4细胞给予1Hz周期性牵张力的机械刺激，将细胞按照持续加力时间：6h，12h，24h，张应力大小：5%elongation，10%elongation，15%elongation分为9个实验组和空白对照组(非加力组)。收取细胞样本，提取总RNA，通过qRT-PCR检测成骨标志物RUNX2，ALP，COL1基因表达水平的差异，通过Westernblot验证成骨相关基因RUNX2的蛋白水平表达差异。抽提miRNA，qRT-PCR检测不同牵张力作用下miR-365基因表达差异，并检测miR-365靶基因HDAC4的表达水平。<br>　　实验结果：1.采取全骨髓贴壁法成功提取出了小鼠BMSCs，细胞贴壁生长，形态呈多角形、长梭形，流式鉴定检测细胞表面抗原CD44/CD29表达呈阳性，CD45/CD34表达呈阴性。2.不同周期性牵张力作用下，小鼠BMSCs成骨相关标志物表达得到不同程度的提高，其中10%张力组对BMSCs成骨分化的促进更为显著，在10%牵张力下细胞加力12h、24h其成骨相关标志物RUNX2、COL1mRNA及RUNX2蛋白水平表达明显高于对照组及5%、15%张力组(P＜0.05)，加力24h时，10%张力组ALPmRNA表达最高(P＜0.05)；加力6h时，15%张力组细胞RUNX2、COL1、ALPmRNA表达水平最高(P＜0.05)。3.周期性牵张力作用下，miR-365表达出现抑制，且随拉伸幅度、加力时间增加miR-365表达降低；牵张力作用下，靶基因HDAC4表达升高，与miR-365表达呈负相关。<br>　　结论：周期性牵张力对小鼠BMSCs成骨分化具有一定促进作用，且10%张力组对鼠BMSCs成骨分化的促进作用更为显著。5%、10%、15%elongation，1Hz周期性牵张力抑制miR-365表达，且提高其靶基因HDAC4mRNA表达水平。