检索历史 清除

摘要背景：前列腺癌是男性中常见的一种恶性肿瘤，通常在发病初期依赖雄激素生长，对雄激素剥夺疗法比较敏感，然而随着疾病的发展，大多数前列腺癌患者发展成去势抵抗型前列腺癌，肿瘤易从原发位点转移到肺，肝，肾，骨，脑等部位，这时雄激素剥夺疗法不再有效，最终导致患者死亡。尽管最近几年前列腺癌的治疗方法有很大提升，然而可选择的有效治疗方法仍然有限，因此目前迫切的需要寻找到新的有效的治疗前列腺癌转移的方法。L-茶氨酸是从茶叶中提取的一种非蛋白质氨基酸衍生物，大量研究表明L-茶氨酸可以抑制多种肿瘤的增殖，以及促进肿瘤的凋亡。至于L-茶氨酸抗肿瘤转移的作用及其分子机制，目前仍然不是特别清楚。在本研究中我们通过体内外实验检测L-茶氨酸对前列腺癌转移的影响，并进一步探索其分子机制。<br>　　方法：采用划痕实验和Transwell实验检测L-茶氨酸对前列腺癌细胞(PC3和DU145)的迁移、侵袭能力的影响，采用悬挂液滴实验检测L-茶氨酸对前列腺癌细胞与细胞间粘附能力的影响。通过CCK8和AnnexinV/PI双染实验检测L-茶氨酸对前列腺癌细胞和正常前列腺上皮细胞存活率的影响。接着通过尾静脉在NOD/SCID小鼠体内注射携带荧光素酶基因的前列腺癌细胞PC3，构建小鼠体内前列腺癌转移模型，并采用活体成像技术以及X-ray骨密度成像仪检测L-茶氨酸对小鼠体内前列腺癌转移的影响。采用Westernblot，荧光定量PCR，细胞免疫荧光，双荧光素酶报告基因实验，染色体免疫沉淀实验，细胞免疫组化实验检测L-茶氨酸抑制前列腺癌转移的分子机制。<br>　　结果：<br>　　1.L-茶氨酸可以抑制前列腺癌细胞的迁移、侵袭能力并且促进前列腺癌细胞与细胞间的粘附能力，此外L-茶氨酸对前列腺癌细胞和正常前列腺细胞的存活率没有影响。<br>　　2.L-茶氨酸可以抑制小鼠体内前列腺癌的转移，并且对小鼠没有生理毒性。<br>　　3.L-茶氨酸可以抑制前列腺癌细胞内MMP9，Snail，N-cadherin，Vimentin的蛋白表达并且促进E-cadherin的蛋白表达。<br>　　4.L-茶氨酸通过抑制前列腺癌细胞内p65的入核以及p65与MMP9和Snail启动子区域的结合下调MMP9和Snail的mRNA转录。<br>　　5.L-茶氨酸通过抑制ERK/NF-κB信号通路下调MMP9、Snail的表达从而抑制前列腺癌细胞的转移。<br>　　结论：L-茶氨酸在体内体外通过抑制ERK/NF-κB信号通路下调MMP9和SnaiI的表达从而抑制前列腺癌的转移，并且对小鼠没有毒副作用。