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摘要目的：<br>　　探讨低氧环境下熊果酸(ursolic acid，UA)对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响和细胞中缺氧诱导因子1α(hypoxiainduciblefactor-1α,HIF-1α)、生存素(Survivin)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)表达情况及其受UA影响后的表达变化。<br>　　方法：<br>　　将TPC-1细胞分为A组：低氧对照组；B组：UA低浓度组(4μmol/L)及C组：UA高浓度组(8μmol/L)，在常氧及低氧环境下对TPC-1细胞进行培养及药物干预。<br>　　1.将TPC-1细胞用不同浓度的UA(0、2、4、8、16、32μmol/L)分别进行干预24h、48h后，应用CCK-8试剂测定UA对细胞的增殖抑制能力。<br>　　2.将TPC-1细胞用不同浓度的UA(0、4、8μmol/L)干预24h后，应用流式细胞术测定细胞凋亡情况。<br>　　3.将TPC-1细胞用不同浓度的UA(0、4、8μmol/L)干预24h后，应用细胞划痕实验检测药物对细胞迁移能力的影响。<br>　　4.将TPC-1细胞用不同浓度的UA(0、4、8μmol/L)干预24h后，应用Transwell小室测定药物对细胞迁袭力的影响。<br>　　5.将TPC-1细胞用不同浓度的UA(0、4、8μmol/L)干预24h后，应用间接免疫荧光法染色，流式细胞术检测细胞中HIF-1α、Survivin、VEGF的蛋白表达情况。<br>　　6.将TPC-1细胞用不同浓度的UA(0、4、8μmol/L)干预24h后，采用qRT-PCR法检测细胞中HIF-1α、Survivin、VEGF的mRNA的表达情况。<br>　　结果：<br>　　1.细胞增殖抑制率在低氧环境下呈浓度依赖性增加，相应组间对比具有统计学差异(P＜0.05)。<br>　　2.应用流式细胞术测定各组凋亡结果：UA可有效诱导TPC-1细胞的凋亡，且随药物浓度的增高，TPC-1细胞凋亡率逐渐升高(A＜B＜C)，经统计各组细胞经UA干预24h后凋亡率分别为A(4.73±0.97)%、B(9.03±1.60)%、C(14.50±0.92)%，通过单因素方差分析，F=49.50，P＜0.05相应组间对比具有统计学差异。<br>　　3.细胞迁移实验结果显示：低氧环境下TPC-1细胞经UA干预24h及48h后，其细胞愈合能力呈浓度及时间依赖性下降，表明TPC-1细胞受UA的影响，其迁移力呈时间及浓度依赖性下降。相应各组之间对比具有统计学差异。<br>　　4.Transwell实验检测细胞侵袭能力结果显示，低氧环境下TPC-1细胞经UA干预24h后，其细胞侵袭能力呈浓度依赖性下降，各组细胞相应侵袭数分别为A组391.67±21.83、B组146.33±7.52、C组96.00±4.58，通过单因素方差分析，F=406.50，P＜0.05，相应组间对比具有统计学差异。<br>　　5.流式细胞术测定细胞中HIF-1α、Survivin、VEGF的蛋白表达结果显示：低氧环境下TPC-1细胞经UA干预24h后，HIF-1α、Survivin、VEGF三种蛋白在各组细胞中均有表达，且其表达量随UA浓度增加而逐渐降低。其中HIF-1α在各组细胞中的蛋白表达量分别为：A组5.28±0.13、B组3.81±0.12、C组0.67±0.27；通过单因素方差分析，F=484.20，P＜0.01，相应组间对比存在统计学差异。Survivin在各组细胞中的蛋白表达量分别为：A组3.09±0.29、B组1.58±0.30、C组0.41±0.21；通过单因素方差分析，F=74.33，P＜0.01，相应组间对比存在统计学差异。VEGF在各组细胞中的蛋白表达量分别为：A组3.23±0.33、B组1.68±0.35、C组0.55±0.25。通过单因素方差分析，F=55.31，P＜0.01，相应组间对比存在统计学差异。<br>　　6.qRT-PCR法检测各组细胞中HIF-1α、Survivin、VEGF的mRNA的表达情况显示：低氧环境下TPC-1细胞经UA干预24h后，HIF-1α、Survivin、VEGF三种mRNA在各组细胞中均有表达，且相对表达量随UA浓度升高而依次降低。其中HIF-1αmRNA在各组细胞中的相对表达量分别为：A组1.00±0.00、B组0.79±0.080、C组0.49±0.072；通过单因素方差分析，F=50.97，P＜0.01，相应组间对比存在统计学差异。SurvivinmRNA在各组细胞中的相对表达量分别为：A组1.00.±0.00、B组0.86±0.042、C组0.70±0.066；VEGFmRNA在各组细胞中的相对表达量分别为：A组1.00.±0.00、B组0.78±0.072、C组0.63±0.056。相应组间对比存在统计学差异(P＜0.05)。<br>　　结论：<br>　　1.UA在低氧环境下可有效抑制甲状腺乳头状癌TPC-1细胞的增殖、促进其凋亡。<br>　　2.UA在低氧环境下可有效抑制TPC-1细胞的迁移及侵袭能力。<br>　　3.UA可通过抑制HIF-1α下调TPC-1细胞中Survivin及VEGF的表达。