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摘要第一部分：患病家系的采集、眼部检查及临床诊断<br>　　目的：对5个疑似为眼皮肤白化病(oculocutaneous albinism，OCA)的非血缘家系进行采集、临床检查及绘制家系图，明确临床诊断，为OCA的临床诊疗提供依据。<br>　　方法：本研究在课题组前期工作的基础上，对5个疑似OCA的非血缘家系进行了分析，经过详细询问其家族史、既往史及婚配史后，绘制家系图，并且对5个家系中先证者进行完整的眼科检查：裂隙灯检查、眼底检查、外观照相、眼前段照相、眼底照相、OCT及VEP检查，全部患者我们均以文字形式详细记录其眼部情况，包括眼前节及眼底视网膜情况，所有眼科检查均由我院从事眼科工作10年以上的医师进行，并且做详细记录。OCT、眼底照相及外观照相均由我院医学影像科同一名医师进行操作检查。散瞳验光由我院验光科同一名验光师进行检查。最后通过临床体征，结合眼部检查结果，对5个家系的患者做出临床诊断。对本研究中的所有家系成员采集外周静脉血5mL，然后严格抗凝保存，用于下一阶段分子遗传学研究。<br>　　结果：5个家系所有参与成员共65人，男性34人，女性31人，年龄从2~72岁。全身及眼部检查发现：5名先证者皮肤均为白色，除了1名成年人，随着年龄增长，毛发变为黑色以外，其余4名幼年先证者，他(她)们的毛发由白色至浅黄色。虹膜颜色，家系1与家系5呈棕黑色，其余先证者呈半透明状，根据色素脱失的程度，颜色稍有不同。4名可以配合视力检查的先证者，视力均较差，2岁先证者视力检查不配合，但是从其视网膜黄斑发育情况判断，视力应较差。全部先证者均有眼球震颤、畏光症状(严重程度有所差异)、其中家系2、3、4、5的先证者视网膜色素大量缺失，可透见脉络膜血管，未见黄斑正常形态。家系1的先证者视网膜可见色素沉着，但未见黄斑正常形态。总体而言，典型的OCA患者体征在这5名先证者身上均有表现，且5个先证者的临床体征表现相同点较多。综合分析5名先证者临床资料可明确临床诊断为OCA。<br>　　结论：这5个家系表型分析均符合单基因孟德尔常染色体隐性遗传模式，其临床特征相近，肤色均为白色，毛发金黄色和白色，同时合并眼部组织的异常，主要表现为眼球震颤、视功能低下、虹膜的色素改变、眼底颜色的改变、畏光症状、黄斑结构发育不良及屈光不正等，同时患者不合并身体其它系统的异常。基于此，5个先证者可以诊断为OCA，但是仅凭临床特征不能对其OCA亚型做出鉴别诊断，这就需要进一步对其进行分子遗传学分析研究。<br>　　第二部分：候选基因筛查分析<br>　　目的：对采集的5个OCA家系进行候选基因检测分析，明确这5个家系的致病基因及其突变，为遗传咨询提供基础。<br>　　方法：对采集的5个OCA家系所有成员的外周静脉血进行基因组DNA提取，对OCA候选基因TYR和OCA2的所有外显子序列设计引物，通过对每个家系的患者进行聚合酶链反应后进行Sanger测序，测序找到的结果在每个家系成员中进行验证，若有发现新突变，则在采集的105例正常人群样本中进行验证。采集家系1和家系4患者以及正常对照者的新鲜血液，分离血清，采用酪氨酸酶酶联免疫试剂盒对血清中酪氨酸酶活性进行检测。<br>　　结果：课题组通过对采集的5个OCA家系进行候选基因分析，找到了这5个家系的致病原因：酪氨酸酶(TYR)基因的c.1114delG和c.1037-7T＞A&c.1037-10_11delTT(家系1)、c.896G＞A和c.549_550delGT(家系3)、c.985T＞C和c.832C＞T(家系4)、c.1199G＞T和c.1265G＞A(家系5)以及OCA2基因的c.593C＞T和c.1426A＞G(家系2)。其中c.1114delG和c.549_550delGT为新发现的突变位点本课题组首次发现(部分成果已发表)，在105个正常人中验证发现其出现频率为0。对家系先证者及正常人的血清酪氨酸酶活性进行检测，发现先证者1的血清酪氨酸酶活性高于先证者4的，两个先证者的血清酪氨酸酶活性均低于正常人，说明TYR基因突变确实导致了酪氨酸酶活性的降低，证实了TYR基因突变导致眼皮肤白化病的发病机制。<br>　　结论：通过对这5个OCA家系的分子遗传学研究，发现家系1、3、4和5的先证者均带有TYR基因的两个杂合突变，符合复合杂合突变模式，为OCA1型；而家系2的先证者带有OCA2基因的2个杂合突变，为OCA2型。通过候选基因筛查，并经过酪氨酸酶酶联免疫实验分析，我们发现了该5个家系的致病基因及其突变，明确了发病机制，这为后续的遗传咨询提供了基础；我们在这5个家系候选基因分析中找到的2个新的基因突变位点(c.1114delG和c.549_550delGT)，为本课题组首次发现(部分成果已发表)，丰富了眼皮肤白化病的基因遗传数据库，为其他眼皮肤白化病患者的诊断提供依据。