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摘要目的：慢性粒细胞性白血病(Chronic myelogenous leukemia, CML)是一种影响血液及骨髓的恶性肿瘤，它的特点是产生大量不成熟的白细胞，这些白细胞在骨髓内聚集，抑制骨髓的正常造血；并且能够通过血液在全身扩散，导致病人出现贫血、容易出血、感染及器官浸润等。临床上将CML分为慢性期，急性期和加速期。慢性期CML症状较轻，慢性期不继续治疗会发展到更危险的急性期期和加速期，在此期间白血病细胞会导致基因发生异常改变，增殖更快，对细胞凋亡产生抵抗力，如果不治疗，最终会导致患者死亡。目前CML的发病原因仍未明确，但临床发现95％以上的慢性粒细胞性白血病患者都会出现费城染色体(Ph),因此认为9号与22号染色体易位形成BCR-ABL融合基因与该疾病密切相关。BCR-ABL融合基因进一步转化为BCR-ABL融合蛋白，该蛋白会指导编码酪氨酸激酶，CML的治疗可以从该位点着手。<br>　　随着分子生物学方面的发展，靶向治疗CML的小分子物质-酪氨酸激酶抑制剂被发现。伊马替尼(IMT)为酪氨酸激酶抑制剂，主要通过抑制BCR-ABL融合蛋白进而发挥分子靶向治疗CML的功虽然IMT对于治疗慢性粒细胞性白血病有一定的临床价值，但是酪氨酸激酶抑制剂包括伊马替尼等，对于治疗CML存在诸多不良反应，较轻的不良反应有浮肿，乏力，皮肤瘙痒，更严重的有胃肠道反应，肌肉酸痛与皮疹等，严重影响了患者的生活质量。为了减轻CML患者服用伊马替尼的不良反应，本文提出了一种新的口服药物传递方法。以合成的N-油酰半乳糖和PLGA作为载体材料，制备N-油酰半乳糖化PLGA纳米粒(GNPs)，将伊马替尼包载于此具有主动吸收的纳米载体中，以实现IMT胃肠道内少释，减少药物降解并促进吸收，综合提高其生物利用度及降低IMT的胃肠道不良反应。<br>　　本文研究方法如下：<br>　　N-油酰-D-半乳糖胺的合成。主要通过酰胺化反应来进行，反应物为油酰氯和半乳糖胺。合成的产物通过H1NMR进行结构鉴定。<br>　　伊马替尼-油酰半乳糖PLGA纳米粒(IMT-GNPs)制备与表征。主要通过溶剂扩散技术来制备IMT-GNPs。以纳米粒粒径和多分散指数(PDI)考察各处方比例对纳米粒的影响，确定最佳粒径与PDI。通过粒径，zeta电位，透射电镜(TEM)下的微观形态，包封率和体外释放对IMT-GNPs进行表征。<br>　　载伊马替尼半乳糖化纳米粒(IMT-GNP)体内生物利用度研究。以SD大鼠为实验动物，口服灌胃IMT-GNPs，IMT混悬液和IMT-NPs(载IMT普通纳米粒)三种制剂，以一定的给药间隔，大鼠尾静脉取血0.25mL，转移至肝素化的离心管中。血样立即以4,500rpm离心5分钟收集血浆，血浆样品处理采用有机溶剂沉淀法。上清液进样，采用HPLC法测定相应时间点的药物浓度，绘制药物浓度-时间曲线。<br>　　IMT-GNPs口服吸收机制研究。通过细胞实验和大鼠肠组织离体成像实验研究了IMT-GNPs在Caco-2细胞上的摄取、内化、跨膜转运及跨上皮吸收性。<br>　　本文实验结果如下：<br>　　合成的N-油酰-D-半乳糖胺合成的N-油酰-D-半乳糖胺具有两亲性，可以作为表面活性物质插入PLGA纳米粒中，实现纳米粒主动吸收功能化。<br>　　伊马替尼-油酰半乳糖PLGA纳米粒(IMT-GNPs)制备与表征的实验结果表明：IMT-GNPs粒径在122nm左右，PDI为0.201，zeta电位为-23.4mv。该纳米粒子在TEM下的微观形态为球形，且分布较均匀。包封率的测定采用离心超滤技术，实现游离药物和纳米粒分离。通过建立体外分析方法，使用高效液相色谱法(HPLC)对续滤液中的药物浓度进行测定，进而通过总药物和游离药物来计算包封率。实验结果表明，制备的纳米粒对IMT的包封率为93.06±0.66％。采用透析法，以IMT溶液和IMT混悬液为参考制剂，考察了IMT-GNPs在不同介质中的释放。体外释放结果表明，相对于IMT溶液和IMT混悬液，IMT-GNPs具有更显著的药物缓释效应。<br>　　载伊马替尼半乳糖化纳米粒(IMT-GNP)体内生物利用度研究的研究结果表明：IMT-NPs和IMT-GNPs的相对生物利用度分别为115.20±15.29%和152.25±22.59%。IMT混悬液，IMT-NPs和IMT-GNPs的血药浓度-时间曲线下面积AUC0-t分别为25.529±4.143μg/mL·h，29.408±3.903μg/mL·h和38.868±5.767μg/mL·h。IMT-GNPs具有促进IMT口服吸收的作用，显著提高了IMT的口服生物利用度。<br>　　IMT-GNPs口服吸收机制研究结果表明：与IMT-NPs相比，IMT-GNPs显示出更高的细胞摄取性和肠上皮通透性，这种高摄取性和高通透性与IMT-GNPs可以通过多种转运机制实现跨膜转运有关。<br>　　通过本研究，我们发现半乳糖化纳米粒(GNPs)具有显著的口服药物传递潜力，可以实现药物胃肠道内少释，不仅能降低药物的胃肠道内降解、减少由于药物暴露导致的胃肠道反应，还可以通过肠上皮半乳糖转运体提高药物的口服吸收量。本研究对不同制剂形态IMT口服吸收特性进行了系统研究，为口服给药系统设计以及开发IMT创新制剂提供了借鉴思路，对IMT的临床应用也具有重要的参考价值。