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Ag2O/TiO2与牙科LED光固化灯联用对口腔致龋菌-变形链球菌的抗菌活性及机理探究

摘要龋齿,是人类口腔重要的慢性疾病之一,世界卫生组织(WHO)将其与肿瘤和心血管疾病并列为人类三大重点防治疾病。格兰氏阳性的兼性厌氧型细菌变形链球菌(Streptococcus mutans, S. mutans)是主要的致龋细菌之一。S.mutans能够产生胞外多糖(EPS)形成致密的生物膜,增强对传统抗菌药物的耐药性,另一方面产生乳酸等有机酸,腐蚀牙齿造成龋坏。传统的牙科药物需要长时间作用于微生物,对浮游菌具有较好的抗菌效果,但对生物膜状效果较差。因此,研发出高效短时间内发挥抗浮游态及生物膜态的S.mutans材料或方法十分重要。本文通过合成具有光催化活性的Ag2O/TiO2,引入牙科临床常用的LED光固化灯,探究短时间的作用对浮游态和生物膜态的S.mutans光动力杀菌作用及机理。同时,我们将Ag2O/TiO2掺杂进已经临床使用的牙科粘附材料玻璃离子水门汀(GIC),探究掺杂后对GIC的机械性能和抗菌性能影响,为Ag2O/TiO2的临床应用提供理论依据。本论文主要研究内容如下:<br>  1.Ag2O/TiO2微米复合物的合成和表征。通过水热合成法和沉积沉淀法合成Ag2O/TiO2微米复合物,采用X-射线粉末衍射(XRD)、扫描电镜(SEM)、透射电镜(TEM)、能谱分析(EDS)和紫外可见漫反射光谱(DRS)和荧光光谱(PL)对其组成、形貌以及光学特性进行表征。结果表明所合成的样品为高纯度的Ag2O/TiO2,直径为2-3?m大小的微球状的TiO2上均匀分布着直径为5-10nm的Ag2O纳米颗粒,与TiO2相比,Ag2O/TiO2在可见光范围内具有增强的光吸收响应。<br>  2.研究Ag2O/TiO2在牙科LED光固化灯作用下对浮游态S.mutans的抗菌活性和机理。采用抑菌圈法、最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)探究Ag2O/TiO2微米复合物对浮游态S.mutans的抗菌活性,结果表明Ag2O/TiO2微米复合物对浮游态S.mutans具有抗菌活性,但是抗菌周期较长。随后引入牙科LED光固化灯,在照射Ag2O/TiO25min时长下,即能对浮游态S.mutans造成显著的杀菌作用。通过活死细菌染色、NAC抗氧化和胞外活性氧(ROS)测定和产热测定,发现Ag2O/TiO2在LED光固化灯照射下主要通过产生ROS来杀灭浮游态的S.mutans。<br>  3.研究Ag2O/TiO2在牙科LED光固化灯作用下对S.mutans生物膜形成和成熟生物膜的抗菌活性和机理。采用结晶紫染色法(菌落计数法)、活死细菌染色和SEM观察,发现Ag2O/TiO2具有显著抑制作用,加上LED光照射后,抑制作用更显著。通过测定S.mutans在生物膜形成过程中的产酸以及EPS的生成和成熟生物膜EPS的生成及相关基因的相对表达,发现Ag2O/TiO2和Ag2O/TiO2+LED可通过抑制产EPS、产酸以及群集感应系统的基因表达,从而抑制生物膜形成和对成熟生物膜进行抑制。<br>  4.研究将Ag2O/TiO2掺杂进GIC中对其机械性能的改性和抗菌活性的增强。通过电子万能试验机检测压缩强度,发现掺杂了Ag2O/TiO2后,Ag2O/TiO2@GIC的机械强度显著提升。此外,Ag2O/TiO2@GIC的吸水率增加,溶解率显著降低。通过菌落计数和MTT染色法,我们发现Ag2O/TiO2@GIC对浮游态S.mutans及其生物膜的形成都有显著的抑制作用。

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导师 吕中
发布时间 2021-06-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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