• 医学文献
  • 知识库
  • 评价分析
  • 全部
  • 中外期刊
  • 学位
  • 会议
  • 专利
  • 成果
  • 标准
  • 法规
  • 临床诊疗知识库
  • 中医药知识库
  • 机构
  • 作者
热搜词:
换一批
论文 期刊
取消
高级检索

检索历史 清除

医学文献>>
  • 全部
  • 中外期刊
  • 学位
  • 会议
  • 专利
  • 成果
  • 标准
  • 法规
知识库 >>
  • 临床诊疗知识库
  • 中医药知识库
评价分析 >>
  • 机构
  • 作者
热搜词:
换一批

Elp3参与酿酒酵母Yap1、Skn7介导的氧化应激机制的研究

摘要Elongator是酵母中重要的转录延伸因子,是由Elp1-Elp6各两拷贝组成的组蛋白乙酰转移酶复合物,通过调控转录、胞吐和tRNA修饰等参与多种生物学过程。Elp3是其核心催化亚基。本实验室前期研究结果表明:Elp3缺失可使酵母H2O2耐受性降低,细胞内MDA、ROS等大幅升高,并使得酵母氧化应激的核心转录因子Yap1的核积累显著降低,表明Elp3功能涉及到Yap1的氧化应激通路。为深入研究Elp3在酵母氧化应激反应中与抗氧化转录因子的联系,探索其影响Yap1核定位的机制,本实验构建了Elp3与转录因子Yap1、Skn7的双缺或三缺菌株,Yap1、Skn7及Yap1入核相关蛋白Trx2、Gpx3、Ybp1的过表达质粒,通过测定H2O2胁迫下,缺失及过表达菌株耐受性及生理生化指标差异,进一步确定Elp3在氧化应激方面的作用。<br>  ROS的大量产生可引起酵母的氧化敏感性,诱导酵母中的氧化应激反应。因此以H2O2处理细胞,对elp3△yap1△、elp3△skn7△、elp3△yap1△skn7△进行敏感性和生存率测定,发现Elp3共缺失加重了yap1△、skn7△、yap1△skn7△的氧化敏感性,降低了其生存率,酵母三缺菌株几乎不能生长;MDA和ROS可反映细胞氧化损伤程度,与敏感性实验结果一致,敲除Elp3使Yap1及Skn7单、双缺菌株的MDA、ROS水平显著升高,表明Elp3直接或间接影响Yap1、Skn7介导的氧化应激。而且在WT中过表达Yap1、Skn7、Trx2、Gpx3、Ybp1可使MDA和ROS明显降低,但在elp3△菌种中过表达5种转录相关蛋白不能改变MDA和ROS水平,进一步表明Elp3确与Yap1、Skn7介导的抗氧化转录的应答机制相关。<br>  Yap1作为抗氧化转录因子,无应激条件下存在于细胞质中,H2O2诱导时,进入细胞核,转录抗氧化靶蛋白从而发挥作用。Yap1入核前需要氧化折叠,其蛋白修饰过程涉及Trx2-Gpx3和Ybp1蛋白的协助,因此以分别转入三种入核相关蛋白的过表达质粒的WT和elp3△菌株为材料,进行Yap1-GFP核定位检测,结果表明,WT菌株过表达Trx2、Gpx3、Ybp1均能不同程度的提高Yap1的核定位比例,而elp3△菌株中过表达Trx2、Gpx3、Ybp1蛋白,Yap1核定位比例并没有明显变化,说明Trx2、Gpx3、Ybp1过表达促进Yap1入核依赖Elp3的存在,提示Elp3可能通过影响Trx2、Gpx3、Ybp1协助Yap1氧化折叠的过程,促进Yap1的核定位,参与Yap1介导的氧化应激。<br>  对WT和elp3△菌株的Yap1、Skn7的转录活性检测表明,elp3△菌株的Yap1、Skn7的转录活性明显高于WT,该结果似与elp3△中Yap1的核积累减少相悖,进一步实验发现,与WT不同,Yap1入核相关蛋白Trx2、Gpx3、Ybp1的过表达并不能提高elp3△菌株中Yap1的转录活性。推测可能是因为Elp3缺失阻碍了Trx2、Gpx3、Ybp1协助Yap1入核的过程,造成Yap1核积累的显著降低,启动其他代偿途径激活核内较少的Yap1的转录活性,减少ROS急剧积累对细胞的伤害,以便最大限度的补救因Elp3缺失引起的氧化敏感表型。

更多
广告
  • 浏览0
  • 下载0

加载中!

相似文献

  • 中文期刊
  • 外文期刊
  • 学位论文
  • 会议论文

加载中!

加载中!

加载中!

加载中!

特别提示:本网站仅提供医学学术资源服务,不销售任何药品和器械,有关药品和器械的销售信息,请查阅其他网站。

  • 客服热线:4000-115-888 转3 (周一至周五:8:00至17:00)

  • |
  • 客服邮箱:yiyao@wanfangdata.com.cn

  • 违法和不良信息举报电话:4000-115-888,举报邮箱:problem@wanfangdata.com.cn,举报专区

官方微信
万方医学小程序
new翻译 充值 订阅 收藏 移动端

官方微信

万方医学小程序

使用
帮助
Alternate Text
调查问卷