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摘要胶质母细胞瘤是有着最高恶性程度的胶质瘤，系目前神经外科最难攻克的难关之一，一直是科研工作者研究的热点。目前的治疗方式是以最大程度的手术切除辅以放疗及化疗，但仍存在着手术切除不完全，放疗量大，化疗易耐受等不足。因此，明确胶质母细胞瘤的发病机制及病理生理过程，寻找新的治疗手段，改善患者预后，成为亟待解决的重要课题，也是神经外科医师及相关学者的研究重点。铁死亡作为近些年新发现的程序性细胞死亡方式，以其铁依赖性、脂质过氧化物堆积的特点区别于凋亡、自噬、坏死等死亡方式。目前，胶质母细胞瘤与铁死亡的关系还未被广泛研究，分子机制的探索仍在继续。是否可以通过铁死亡的相关指标来辅助诊断胶质母细胞瘤，以及以铁死亡为目标去指导胶质母细胞瘤的治疗还没有得出明确结论。青蒿素及其衍生物已被证明对于胶质母细胞瘤细胞具有杀伤作用。青蒿素具有低毒性、选择性杀伤作用和低耐药性的特点，这使得它成为当下流行的抗肿瘤研究方向之一。已经有部分研究开始探索青蒿素及其衍生物与铁死亡的关系，然而，关于青蒿素与胶质母细胞瘤的研究较少，青蒿素是否可以在胶质母细胞瘤细胞中激活铁死亡还未被研究。因此，本课题进行了如下研究：<br>　　（1）通过对胶质瘤组织和正常组织中铁死亡相关基因表达的测定，明确在胶质母细胞瘤中，GPX4表达明显上升，而ACSL4的上升幅度低于低级别胶质瘤（无显著差异），证明在胶质母细胞瘤中存在低水平的铁死亡激活（未造成明显杀伤作用）。ATF4水平呈现上调趋势（它被认为参与肿瘤抵抗铁死亡过程）。P53也显著上调（但支持P53和GPX4之间相关性的证据较弱）。<br>　　（2）通过细胞生存实验，发现双氢青蒿素（DHA）对于胶母细胞瘤细胞系U87和A172的杀伤作用显著强过对于正常星形胶质细胞NHA。为了解释选择性杀伤作用的由来，本研究进一步通过蛋白免疫印迹实验测定了转铁蛋白受体（TfR）在 NHA、U87 和 A172 的表达， TfR在U87和A172中的表达明显高于在NHA中，鉴于DHA的体内活性与亚铁离子密切相关，这可能是DHA选择性杀伤作用的机制之一。<br>　　（3）通过对DHA处理前后U87和A172细胞中总过氧化物以及脂质过氧化物水平的测定，本研究发现DHA引起过氧化物水平的升高，尤其是脂质过氧化物水平的升高，证明了铁死亡的激活。通过对铁死亡相关蛋白表达的测定，发现GPX4的显著下降，这提示在胶质母细胞瘤细胞中，GPX4是DHA引起铁死亡中非活性氧依赖途径的关键靶点。免疫荧光实验和透射电子显微镜下的结构差异也印证了上述结论。铁死亡抑制剂 ferrostatin-1 可以显著逆转DHA引起的脂质过氧化物堆积和细胞死亡，提示铁死亡是DHA引起的胶质母细胞瘤细胞死亡的关键机制之一。<br>　　通过以上实验结果，本研究得出如下结论：<br>　　（1）胶质母细胞瘤中铁死亡的激活水平较低，不足以产生杀伤作用。相关指标相较于正常组织有明显变化，可以作为靶向治疗的研究靶点；<br>　　（2）双氢青蒿素具有选择性杀伤作用，原因之一是胶质母细胞瘤相较于正常组织转铁蛋白受体表达水平的提升；<br>　　（3）双氢青蒿素可以在胶质母细胞瘤中通过产生过氧化物和抑制GPX4两条途径来激活铁死亡，并产生明显的细胞毒作用。