摘要目的:转录因子与目的基因5′端上游特定序列专一性结合,从而保证目的基因以特定的强度在特定的时间与空间表达。这项研究旨在证明SP2是Ski基因的上游转录因子,具有特定的结合位点并指导Ski在星形胶质细胞的增殖中发挥调控作用。<br> 方法:利用Jaspar、USCS数据库嫁接预测并逐步缩小阈值筛选Ski基因上游转录因子,从而初步确定出转录因子SP2。接下来,分析了SP2与Ski基因在正常星形胶质细胞与反应性星形胶质细胞的表达相关性,以及星形胶质细胞增殖的变化。为了进一步证实SP2调控Ski对星形胶质细胞增殖的影响,将针对SP2的siRNA转染到星形胶质细胞中,然后分析Ski、PCNA、CyclinD1的表达,以及星形胶质细胞增殖的变化,以评估SP2敲减后对Ski的调控以及对星形胶质细胞增殖的影响。最后利用双荧光素酶报告实验证实转录因子SP2在Ski基因启动子区域有明确的结合位点。<br> 结果:根据数据库分析,预测SP2是Ski基因的上游转录因子。实验证实SP2在Ski基因启动子区域有明确的结合位点。SP2与Ski在星形胶质细胞中的表达呈正相关,敲减SP2可使Ski基因的表达下调并抑制星形胶质细胞的增殖。<br> 结论:首次发现并证实转录因子SP2靶向调控Ski基因在星形胶质细胞的增殖中起着至关重要的作用。这一发现可能有助于找到脊髓损伤后恢复治疗策略的新靶点。
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