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摘要目的：<br>　　明确MEHP暴露对SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞增殖和迁移的影响，探讨ERα在MEHP影响SH-SY5Y细胞增殖和迁移中的作用，为阐明MEHP暴露促进肿瘤细胞增殖和转移作用机制提供科学依据，为寻找神经母细胞瘤的防治靶点提供新思路。<br>　　方法：<br>　　用含10%胎牛血清的DMEM培养基常规培养SH-SY5Y细胞。给予SH-SY5Y细胞梯度浓度MEHP暴露，采用CCK-8法检测SH-SY5Y细胞存活率，根据CCK-8结果确定染毒剂量，实验分组为空白对照组（0μM MEHP）、溶剂对照组（0.1%DMSO）、低剂量组（10μM MEHP）、中剂量组（50μM MEHP）、高剂量组（250μM MEHP）和雌二醇对照组（100nM E2），暴露12h和24h后收集细胞和上清液。采用ERαsiRNA转染SH-SY5Y细胞，并通过Q-PCR验证ERα沉默效率。设置空白对照组（0μM MEHP）、溶剂对照组（0.1%DMSO）、沉默对照组（Transfect+siRNA（siNC））、沉默暴露组（siRNA+250μM MEHP）、暴露组（250μM MEHP）和雌二醇对照组（100nM E2），于24h后收集细胞及其上清液。采用流式细胞术检测细胞周期；划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移情况；Q-PCR法和Western Blot法检测ERα、细胞增殖和迁移相关基因mRNA和蛋白表达水平。<br>　　采用IBM SPSS24.0进行统计分析，单因素方差分析比较不同染毒剂量组间各指标的差异，采用LSD法进行组间的两两比较；采用t检验比较不同时间段各指标的差异。以P＜0.05为差异具有统计学意义。<br>　　结果：<br>　　1.MEHP暴露12h，MEHP各暴露组SH-SY5Y细胞存活率均显著高于对照组（P＜0.05）；MEHP暴露24h，125～1000μM MEHP各暴露组细胞存活率均显著高于对照组（P＜0.05）；且8～1000μM各暴露组24h细胞存活率明显低于12h组细胞（P＜0.05）。<br>　　2.MEHP暴露12h和24h后，各剂量暴露组SH-SY5Y细胞周期无明显变化（P＞0.05）；随MEHP暴露时间的增加，中剂量组G1期细胞百分数显著增加（P＜0.05），S期和G2期细胞百分数显著降低（P＜0.05）。<br>　　3.MEHP暴露12h和24h，高剂量组SH-SY5Y细胞迁移距离和迁移数显著高于中剂量组和低剂量组（P＜0.05），中剂量组细胞相对迁移数显著高于对照组（P＜0.05），中剂量组和低剂量组细胞迁移距离和迁移数明显小于E2组（P＜0.05）；MEHP暴露24h后，低、高剂量组和E2组细胞迁移距离明显高于MEHP暴露12h的细胞迁移距离（P＜0.05）。<br>　　4.MEHP暴露12h，高剂量组SH-SY5Y细胞ERαmRNA表达水平显著高于其余各组（P＜0.05），且ERαmRNA表达水平随MEHP浓度升高而升高（P＜0.05），MEHP各暴露组和E2组ERα蛋白表达水平显著高于对照组（P＜0.05），且ERα表达水平随MEHP浓度升高而升高（P＜0.05）；MEHP暴露24h，MEHP各暴露组和E2组ERαmRNA和ERα蛋白表达水平均显著高于对照组（P＜0.05），且表达水平随MEHP浓度升高而升高（P＜0.05）。MEHP暴露24h后，中、低剂量组和E2组ERαmRNA表达水平明显高于MEHP暴露12h的表达水平（P＜0.05）。<br>　　5.MEHP暴露12h，高剂量组SH-SY5Y细胞PCNA mRNA表达水平显著高于其余各组（P＜0.05），且其表达水平随MEHP浓度升高而升高（P＜0.05）；各MEHP暴露组MMP-2mRNA表达水平明显低于对照组（P＜0.05），但其表达水平随MEHP浓度的升高而升高（P＜0.05）；高剂量组和E2组MMP-9mRNA表达水平显著高于中剂量组、低剂量组和对照组（P＜0.05）；低、中剂量组TIMP-2mRNA表达水平显著高于对照组（P＜0.05），高剂量组和E2组其表达水平显著低于对照组（P＜0.05）。MEHP暴露12h，中、高剂量组和E2组PCNA蛋白表达水平显著高于低剂量组和对照组（P＜0.05）；各MEHP暴露组和E2组MMP-2蛋白表达水平显著高于对照组，且其表达水平随MEHP浓度升高而升高（P＜0.05）；高剂量组和E2组MMP-9蛋白表达水平明显高于低剂量组和对照组（P＜0.05）；低、中剂量组TIMP-2蛋白表达水平明显高于对照组（P＜0.05），高剂量组和E2组其蛋白表达水平显著低于对照组（P＜0.05），并且TIMP-2mRNA和蛋白表达水平随MEHP浓度升高而降低（P＜0.05）。<br>　　6.MEHP暴露24h，各MEHP暴露组和E2组SH-SY5Y细胞PCNA mRNA表达水平显著高于对照组（P＜0.05），且其表达水平随MEHP浓度升高而升高（P＜0.05）；中、高剂量组和E2组MMP-2mRNA表达水平显著高于低剂量组（P＜0.05）；高剂量组和E2组MMP-9mRNA表达水平显著高于其余各组；各MEHP暴露组TIMP-2mRNA表达水平显著高于对照组（P＜0.05）；MEHP暴露24h，高剂量组和E2组PCNA和MMP-9蛋白表达水平明显高于低、中剂量组和对照组（P＜0.05）；中、高剂量组和E2组细胞MMP-2蛋白表达水平明显高于低剂量组和对照组（P＜0.05）；低剂量组和中剂量组蛋白TIMP-2表达水平显著高于对照组（P＜0.05），高剂量组和E2组其蛋白表达水平显著低于对照组（P＜0.05），并且TIMP-2mRNA和蛋白表达水平随MEHP浓度升高而降低（P＜0.05）。<br>　　随着暴露时间增加，MEHP暴露24h后，低剂量组PCNA、TIMP-2mRNA表达水平，中剂量组MMP-2、MMP-9和TIMP-2mRNA表达水平以及高剂量组TIMP-2mRNA和蛋白表达水平均显著升高。<br>　　7.ERα基因沉默后，与沉默对照组相比，SH-SY5Y细胞暴露于250μM MEHP24h，G1期和G2期的细胞百分数明显减少（P＜0.05），S期的细胞百分数显著增加（P＜0.05），与正常细胞暴露于MEHP24h相比，G2期的细胞百分数明显减少（P＜0.05）；ERα基因沉默后，SH-SY5Y细胞中G1期和G2期的细胞百分数明显增加（P＜0.05），S期的细胞百分数显著减少（P＜0.05）。<br>　　8.ERα基因沉默后，SH-SY5Y细胞相对迁移距离和迁移数明显减小，迁移能力明显降低（P＜0.05）；与正常细胞暴露于MEHP24h相比，ERα基因沉默组细胞相对迁移距离显著缩短、迁移数减少，迁移能力明显降低（P＜0.05）。<br>　　9.ERα基因沉默SH-SY5Y细胞PCNA、MMP-2、MMP-9mRNA表达水平显著降低（P＜0.05），TIMP-2mRNA表达水平显著升高（P＜0.05）；ERα基因沉默后，给予细胞MEHP处理24h，细胞PCNA、MMP-9mRNA表达水平较ERα基因沉默前显著降低（P＜0.05），TIMP-2mRNA表达水平显著升高（P＜0.05）。ERα基因沉默的SH-SY5Y细胞中PCNA、MMP-2蛋白表达水平显著降低（P＜0.05），TIMP-2蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）；ERα基因沉默后，给予细胞MEHP暴露24h，细胞中PCNA、MMP-9蛋白表达水平较ERα基因沉默前显著降低（P＜0.05），TIMP-2蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）。<br>　　结论：<br>　　1.MEHP暴露能够促进SH-SY5Y细胞增殖。<br>　　2.MEHP暴露可上调SH-SY5Y细胞增殖相关基因PCNA mRNA和蛋白的表达水平；ERα沉默可引起细胞周期阻滞，降低PCNA蛋白表达水平，表明ERα在MEHP暴露所致SH-SY5Y细胞增殖中起调控作用。<br>　　3.MEHP暴露可促进SH-SY5Y细胞迁移，ERα沉默可缩短细胞迁移距离、减少细胞迁移数，削弱细胞的迁移能力，表明ERα在MEHP暴露所致SH-SY5Y细胞迁移中起调控作用。<br>　　4.MEHP暴露可能通过上调MMP-2和MMP-9表达水平、下调TIMP-2表达水平促进SH-SY5Y细胞迁移；ERα沉默可抑制MMP-2和MMP-9表达水平，同时上调TIMP-2表达水平；表明ERα在MEHP暴露所致SH-SY5Y细胞转移中起调控作用。<br>　　5.MEHP可通过拟雌激素作用激活ERα，在SH-SY5Y细胞增殖和转移中起促进作用。