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聚多巴胺基纳米载药平台和荧光纳米探针的开发及应用

摘要纳米材料作为一类新兴材料,表现出诸多优异的性质,如合成过程简单、表面易于多功能修饰、良好的生物安全性、尺寸大小可控等。基于这些优点,纳米材料在能源环境、材料科学、生物医学等领域备受关注。聚多巴胺(PDA)作为一种有机聚合物纳米材料,具有良好的生物相容性和生物可降解性、较高的光热转换效率、丰富的表面官能团以及较强的吸附性等特点。因此,PDA纳米材料在癌症诊疗、药物运载、生物检测等方面有着广阔的应用前景。<br>  在目前的研究中,所设计的聚多巴胺基纳米材料较为复杂,制备过程较为繁琐。此外,纳米复合材料的靶向性、药物装载能力等有待改善和提高。因此,为了提高PDA对恶性肿瘤的光热治疗效果,采用简单方法制备具有高度靶向性的PDA纳米材料,并将其作为药物载体用于肿瘤光热和药物的协同治疗是可行的治疗肿瘤的手段。另一方面,合适尺寸的PDA具有荧光性质,有望用于细胞内关键小分子的检测和成像,从而实现对肿瘤治疗过程的示踪。目前的研究中,将荧光PDA用于生物检测和成像的报道相对较少,并且PDA的发光机制以及检测原理有待进一步深入研究。因此,构建基于PDA的新型荧光纳米探针,用于细胞内小分子物质的检测具有重要研究意义。<br>  基于此,本论文主要研究了以下两方面的内容:<br>  1、第二章构建了一种基于PDA纳米复合物的纳米载药平台用于运载自噬抑制剂,研究抑制细胞自噬在肿瘤光热治疗中的作用。首先合成PDA纳米粒子,为提高纳米载体对肿瘤细胞的靶向能力,在PDA纳米粒子表面连接含有叶酸(FA)和半乳糖苷(Gal)修饰的聚乙二醇(PEG);同时,连接含有罗丹明B(RhB)修饰的PEG,使纳米载体具有可以在体内外示踪和成像的功能。然后,利用π-π堆积相互作用,在纳米载体PDA-PEG-RhB/FA/Gal(PPRFG)表面负载自噬抑制剂氯喹(CQ ),得到纳米载药体系PPRFG/CQ。实验结果表明,该纳米载药体系具有良好的生物相容性、低细胞毒性、一定的药物负载能力和较高的光热转换效率。光热治疗时,PPRFG产生的热效应会引起肿瘤细胞发生保护性自噬,使光热治疗的效果降低。而CQ在肿瘤细胞酸性条件下的释放能够抑制这种保护性自噬,增强光热治疗的效果,这在活体实验中得到了很好的验证。<br>  2、第三章构建了一种基于PDA的荧光纳米探针,实现了对羟基自由基(·OH)简单、快速、高选择性的检测。首先在碱性条件下氧化多巴胺(DA),合成荧光聚多巴胺(F-PDA)纳米粒子,并对其大小和形貌进行表征。然后探究了F-PDA对·OH的检测。实验结果表明,F-PDA纳米探针具有稳定的荧光性质(λex=410nm、λem=510nm),在0-140μM范围内,·OH的浓度与F-PDA的荧光强度呈线性关系(R2=0.9988)。并且常见的金属离子、氨基酸、氧化性物质以及还原性物质对·OH的检测均不产生干扰,说明F-PDA纳米探针具有良好的选择性。此外,F-PDA纳米探针具有低细胞毒性,被成功用于细胞内·OH的荧光成像。该荧光纳米探针的构建为细胞内其它活性物种的检测提供了思路。

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