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摘要目的：制备负载去甲斑蝥素（NCTD）的纳米粒及构建共载去甲斑蝥素纳米粒（NCTD-NPs）和阿霉素（Dox）的温敏性水凝胶体系，并通过体外、体内实验研究该体系对肝细胞肝癌的治疗作用。<br>　　方法：本研究通过ε-己内酯的开环聚合反应制备聚己内酯-聚乙二醇-聚己内酯（PCL-PEG-PCL，PCEC），再以PCEC聚合物作为载体，采用薄膜分散的方法制备NCTD-NPs。然后将NCTD-NPs与Dox一起包封在基于Pluronic F127（PF127）的温敏性水凝胶中，构建了双重载药水凝胶体系。采用透射电镜（TEM）和动态光散射法（DLS）对NCTD-NPs的形貌及粒径进行表征，利用高效液相色谱仪检测NCTD-NPs的载药率和包封率，通过荧光摄取实验研究细胞对PCEC纳米粒的摄取情况，采用旋转流变仪研究载药水凝胶体系的流变特性，通过透析法对NCTD-NPs、载药水凝胶体系的体外药物释放进行研究，体外细胞毒性实验（MTT法）研究空白PCEC纳米粒和载药水凝胶体系对HepG2细胞的毒性作用。然后，建立肝癌H22细胞皮下移植瘤模型，并随机分为4组（n=10）：生理盐水组（NS组）、空白水凝胶组、游离药物组（NCTD+Dox）和载药水凝胶体系组。然后，采用肿瘤内注射的给药方式进行分组治疗，并监测各组荷瘤小鼠的体重变化、肿瘤体积及生存时间。治疗结束后，每组处死一半的小鼠，收集肿瘤组织及重要器官组织，采用苏木精和伊红(H&E)染色评估肿瘤的坏死情况及药物对小鼠的系统毒性，并通过免疫组化测定肿瘤组织中Ki-67和CD31的表达水平。<br>　　结果：采用薄膜分散的方法成功制备NCTD-NPs，呈球形颗粒，粒径为88.5±1.8nm，具有较高的载药率及包封率，分别为8.80±0.42%、88.03±4.23%。荧光摄取实验：生理盐水组及空白纳米组呈黑色，无荧光显示；游离香豆素6组和载香豆素-6纳米粒（C6-NPs）组显示出明显的荧光，且C6-NPs组的荧光强度明显强于游离香豆素6组。制备的载药水凝胶体系具备较好的温敏性，室温下为溶胶状态，体温下迅速变成不流动的凝胶状态。体外释放实验：游离NCTD组的药物迅速被释放至介质中，然而，NCTD-NPs组和载药水凝胶体系组中的药物都能以缓慢、持续的方式释放，且无明显的突发释放行为。细胞毒性实验：空白PCEC纳米粒的毒性作用较弱，可作为一种安全的药物载体；此外，当Dox的浓度大于1μg/mL时，载药水凝胶体系的细胞毒性显著高于游离药物。体内实验结果表明，治疗结束后，载药水凝胶体系组肿瘤体积为378.84±150.32mm3，显著小于NS组(1086.72±473.92mm3，p＜0.01)、空白水凝胶组(990.57±491.24mm3，p＜0.01)和游离药物组(624.59±315.59mm3，p＜0.05)的肿瘤体积，且差异具有统计学意义。载药水凝胶体系组中小鼠的中位生存期为67天，明显长于NS组(41天)、空白水凝胶组(45天)和游离药物组(53天)，且差异具有统计学意义(均P＜0.05)。通过H&E染色观察小鼠重要器官（心、肝、脾、肺和肾），无明显的组织损伤或病变。肿瘤组织H&E染色显示，游离药物组和载药水凝胶体系组的切片可见较多的坏死区域。免疫组化分析显示，载药水凝胶体系组Ki-67阳性率(22.46±2.51%)明显低于NS组(85.16±3.41%，P＜0.01)、空白水凝胶组(84.37±2.97%，P＜0.01)和游离药物组(38.77±4.85%，P＜0.05)；同样地，载药水凝胶体系组微血管密度(7.67±0.94)明显低于游离药物组(15.34±2.05，P＜0.05)、空白水凝胶组(33.34±3.30，P＜0.01)和NS组(34.67±2.87，P＜0.01)。<br>　　结论：双重载药水凝胶体系具备较好的温敏性特性和药物缓释特性。通过肿瘤内注射给药的方式，载药水凝胶体系相比于游离药物，能更有效地抑制肝癌皮下移植瘤的生长，并延长小鼠的中位生存期。同时，载药水凝胶体系没有表现出明显的系统毒性，并且可以减少游离药物的毒副作用，是一种有效、安全的局部化疗药物递送体系。